美洲黑杨木质素生物合成转录因子PdLim1基因的克隆、表达及植物表达载体构建
Isolation, expression and construction of plant expression vector of PdLim1, a transcription factor involved in the lignin biosynthesis in Populus deltoides.
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摘要: 在植物体内，Lim1基因与木质素生物合成酶基因启动子区域富含AC的Pal盒结合，转录调控木质素的生物合成过程。该研究组合利用生物信息学和realtime PCR方法，首次从美洲黑杨形成层cDNA中分离出PdLim1cDNA全长，并进行了测序和序列分析。结果表明，克隆的美洲黑杨PdLim1cDNA片段总长为952 bp，基因内部含有完整的开放阅读框架，大小为594 bp，可编码长度为197个氨基酸残基的蛋白质，所推导的蛋白质氨基酸序列与拟南芥AtLim1和水稻OsLim1蛋白的同源性分别为82.1％和78.2％。组织特异realtime PCR结果显示， PdLim1基因在杨树根、茎、叶片和顶端分生组织中均有表达，但其表达模式却不同：PdLim1在成熟叶片和成熟木质部中表达丰度最高，在树皮、根部、韧皮部和形成层表达丰度较高，在未成熟木质部有少量表达，在顶端分生组织中表达丰度最低。 在此基础上，以pBI121为表达载体，构建了在CaMV35S启动子驱动下，PdLim1基因的正义（pBI121-CaMV35S-sense PdLim1）和反义（pBI121-CaMV35S-antisense PdLim1）类型的双元植物表达载体。该研究为杨树PdLim1的基因工程改良木材纤维品质性状提供了重要的理论依据，具有潜在的应用价值。
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关键词:
- 杨树 /
- Lim1转录因子 /
- 木质素生物合成 /
- realtime PCR /
- 植物表达载体
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