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策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

赵桂媛 魏志刚 刘关君 张凯旋 刘桂丰 杨传平

赵桂媛, 魏志刚, 刘关君, 张凯旋, 刘桂丰, 杨传平. 策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库[J]. 北京林业大学学报, 2010, 32(1): 52-56.
引用本文: 赵桂媛, 魏志刚, 刘关君, 张凯旋, 刘桂丰, 杨传平. 策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库[J]. 北京林业大学学报, 2010, 32(1): 52-56.
ZHAO Gui-yuan, WEI Zhi-gang, LIU Guan-jun, ZHANG Kai-xuan, LIU Gui-feng, YANG Chuan-ping.. Construction of fulllength cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2010, 32(1): 52-56.
Citation: ZHAO Gui-yuan, WEI Zhi-gang, LIU Guan-jun, ZHANG Kai-xuan, LIU Gui-feng, YANG Chuan-ping.. Construction of fulllength cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2010, 32(1): 52-56.

策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

Construction of fulllength cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy

  • 摘要: 为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART (RNA 转录过程中的5′末端转换机制) 技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106 pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109 pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5~2.0 kb之间,平均长度为1.12 kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。
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出版历程
  • 收稿日期:  1900-01-01
  • 修回日期:  1900-01-01
  • 刊出日期:  2010-01-30

策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库

摘要: 为了研究小黑杨木材形成过程中的关键基因,以2年生小黑杨茎形成层组织为试验材料提取RNA,采用SMART (RNA 转录过程中的5′末端转换机制) 技术合成cDNA第一链,通过LD-PCR合成双链cDNA。利用SfiⅠ限制性酶酶切后将其连接到质粒载体pDNR-LIB上,采用电穿孔法将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞DH5α中,构建全长cDNA文库。文库质量鉴定表明:原始文库滴度为2.18×106 pfu/mL,扩增后的文库滴度为5.46×109 pfu/mL,重组率为96%。插入片段长度在0.5~2.0 kb之间,平均长度为1.12 kb,表明构建的小黑杨茎形成层cDNA文库较为理想。

English Abstract

赵桂媛, 魏志刚, 刘关君, 张凯旋, 刘桂丰, 杨传平. 策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库[J]. 北京林业大学学报, 2010, 32(1): 52-56.
引用本文: 赵桂媛, 魏志刚, 刘关君, 张凯旋, 刘桂丰, 杨传平. 策略构建小黑杨茎形成层全长cDNA文库[J]. 北京林业大学学报, 2010, 32(1): 52-56.
ZHAO Gui-yuan, WEI Zhi-gang, LIU Guan-jun, ZHANG Kai-xuan, LIU Gui-feng, YANG Chuan-ping.. Construction of fulllength cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2010, 32(1): 52-56.
Citation: ZHAO Gui-yuan, WEI Zhi-gang, LIU Guan-jun, ZHANG Kai-xuan, LIU Gui-feng, YANG Chuan-ping.. Construction of fulllength cDNA library from stem cambium of Populus simonii ×P. nigra with SMART strategy[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2010, 32(1): 52-56.

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