高级检索

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析

潘翔 李娜 李印军 魏弘宜 张蕾 陆海

潘翔, 李娜, 李印军, 魏弘宜, 张蕾, 陆海. 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析[J]. 北京林业大学学报, 2013, 35(1): 36-44.
引用本文: 潘翔, 李娜, 李印军, 魏弘宜, 张蕾, 陆海. 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析[J]. 北京林业大学学报, 2013, 35(1): 36-44.
PAN Xiang, LI Na, LI Yin-jun, WEI Hong-yi, ZHANG Lei, LU Hai. Cloning expression and characterization of an ascorbate peroxidase gene PtAPX2 from Populus tomentosa.[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2013, 35(1): 36-44.
Citation: PAN Xiang, LI Na, LI Yin-jun, WEI Hong-yi, ZHANG Lei, LU Hai. Cloning expression and characterization of an ascorbate peroxidase gene PtAPX2 from Populus tomentosa.[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2013, 35(1): 36-44.

毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析

Cloning expression and characterization of an ascorbate peroxidase gene PtAPX2 from Populus tomentosa.

  • 摘要: 以毛白杨总RNA为模板反转录得到cDNA,克隆获得抗坏血酸过氧化物酶基因家族中的一个成员PtAPX2 864 bp的编码序列。该基因编码的蛋白包含287个氨基酸,理论分子质量为3178 ku,C末端包含锚定于过氧化物酶体跨膜结构域,推断其为过氧化物酶体定位蛋白。构建了PtAPX2原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了纯化的重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。PtAPX2对抗坏血酸的Km值为 (1.37±0.22) mmol/L,Vmax值为 (3.95±0.46) mmol/(L•min•mg);对H2O2的Km值为 (0.026±0.003) mmol/L,Vmax值为 (1.27±0.03) mmol/(L•min•mg);该酶在28 ℃,pH 7.0~7.4时活性最高。实时荧光定量PCR分析表明,PtAPX2在杨树老叶叶肉中表达量最高。对PtAPX2亚细胞定位、底物结合特征、酶学性质及组织特异性表达的分析加深了对木本植物抗氧化机理的认识。
  • [1] 王兵, 程子义, 张蕾, 赵芝婧, 陆海, 刘頔.  过表达毛白杨线粒体APX基因烟草提高抗逆能力的研究 . 北京林业大学学报, 2020, 42(7): 33-39. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190390
    [2] 霍晓薇, 徐千惠, 王延伟.  杨树miRNA的靶基因预测及低氮胁迫表达分析 . 北京林业大学学报, 2019, 41(8): 28-37. doi: 10.13332/j.1000-1522.20190205
    [3] 尹玢, 陆海.  转录组分析氧化胁迫对毛白杨悬浮细胞生长发育的影响 . 北京林业大学学报, 2019, 41(9): 90-98. doi: 10.13332/j.1000-1522.20190157
    [4] 张永卓, 刘雅琳, 陆海, 李慧.  转录组分析组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA对毛白杨悬浮细胞表达谱的影响 . 北京林业大学学报, 2018, 40(9): 1-14. doi: 10.13332/j.1000-1522.20180158
    [5] 雷恒久, 苏淑钗, 马履一, 马仲.  平欧杂交榛CBF/DREB1转录因子ChaCBF1基因的克隆与功能分析 . 北京林业大学学报, 2016, 38(10): 69-79. doi: 10.13332/j.1000-1522.20150528
    [6] 曹山, 蒋璐瑶, 李丽红, 要笑云, 张强, 撖静宜, 王莹, 李慧, 陆海.  毛果杨中链酰基辅酶A合成酶的克隆及酶学分析 . 北京林业大学学报, 2016, 38(7): 9-15. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160121
    [7] 白凤莹, 曾青青, 康宁, 索玉静, 廖婷, 张平冬, 康向阳.  毛白杨基因库优树倍性检测及性状对比分析 . 北京林业大学学报, 2015, 37(4): 113-119. doi: DOI:10.13332/j.1000-1522.20140247
    [8] 郭鹏, 张士刚, 邢鑫, 姜健.  欧美杨PdPP2C基因的克隆与功能分析 . 北京林业大学学报, 2015, 37(2): 100-106. doi: 10.13332/j.cnki.jbfu.2015.02.018
    [9] 郭鹏, 邢鑫, 张万筠, 姜健.  欧美杨脱水素PdDHN2b的克隆与表达分析 . 北京林业大学学报, 2015, 37(1): 22-36. doi: 10.13332/j.cnki.jbfu.2015.01.017
    [10] 石玉波, 张荻, 申晓辉, 王玲, 卓丽环.  百子莲CONSTANS 同源基因的克隆及表达分析 . 北京林业大学学报, 2014, 36(4): 113-120. doi: 10.13332/j.cnki.jbfu.2014.04.021
    [11] 郭斌, 刘军梅, 李英, 陈仲, 李昊, 叶梅霞, 王佳, 安新民.  毛白杨PtPCP-like基因的克隆及其遗传转化初报 . 北京林业大学学报, 2012, 34(5): 31-36.
    [12] 连青龙, 韩昊君, 辛海波, 陈莉, 胡小燕, 何秀丽, 义鸣放.  唐菖蒲GhAOS基因的克隆与表达 . 北京林业大学学报, 2011, 33(2): 77-83.
    [13] 刘军梅, 李昊, 崔东清, 叶梅霞, 宋体, 张志毅, 安新民, .  毛白杨labA-like1基因的克隆与表达特性及其表达载体的构建 . 北京林业大学学报, 2011, 33(4): 55-62.
    [14] 卢磊, 赵敏, 赵丽艳, 梁书诚, 李泰仑, 杜美惠.  重组血红密孔菌漆酶的纯化、酶学性质及染料脱色研究 . 北京林业大学学报, 2010, 32(6): 125-129.
    [15] 王晓雪, 蒋湘宁, 陆海.  毛白杨4--香豆酸:辅酶A连接酶338Val缺失突变分析 . 北京林业大学学报, 2009, 31(3): 84-88.
    [16] 唐文莉, 彭镇华, 高健, .  刚竹属3种重要散生竹光系统Ⅰ基因(Lhca1)的克隆、序列分析和蛋白结构预测 . 北京林业大学学报, 2008, 30(4): 109-115.
    [17] 陆平, 刘足根, 雷妮娅, 张建军, 于文吉, 于海霞, 张春晓, 孙志蓉, 吴家兵, 李俊, 奚如春, 邵杰, 周睿, 郎璞玫, 李黎, 武林, 宋先亮, 焦雯珺, 周艳萍, 金则新, 张志山, 吕文华, 郑景明, 马玲, 许景伟, 高克昌, 索安宁, 毕华兴, 朱清科, 张小由, 郑红娟, 余养伦, 纳磊, 于志明, 李传荣, 李钧敏, 赵秀海, 盖颖, 习宝田, 韦方强, 马履一, 朱教君, 赵广杰, 陈少良, 翟明普, 蔡锡安, 关德新, 葛剑平, 赵文喆, 戴伟, 饶兴权, 陈勇, Kwei-NamLaw, 赵平, 王瑞刚, 曾小平, 谭会娟, 贾桂霞, 于波, 杨永福, 樊敏, 方家强, 张春雨, ClaudeDaneault, 王天明, 江泽慧, 马履一, 李笑吟, 李俊清, 李增鸿, 张宇清, 袁小兰, 王文全, 朱艳燕, 夏良放, 张弥, 崔鹏, 王贺新, 郭孟霞, 殷宁, 何明珠, 袁飞, 王卫东, 李庆卫, 刘丽娟, 张欣荣, 贺润平, 李丽萍, 唐晓军, 吴秀芹, 陈雪梅, 韩士杰, 邓宗付, 江杰, 熊颖, 毛志宏, 吴记贵, 王旭琴, 王月海, 于贵瑞, 蒋湘宁, 刘鑫, 孔俊杰, 王娜, 郑敬刚, 李新荣, 葛剑平, 王贵霞, 聂立水, 王瑞辉, 孙晓敏, 林靓靓, 郭超颖, 董治良.  双向启动子构建及在毛白杨中瞬时表达研究 . 北京林业大学学报, 2007, 29(1): 119-122.
    [18] 李在留, 周章义, 孙青, 贺窑青, 范丙友, 郝晨, 李艳华, 欧阳杰, 刘丽, 胡晓丹, 乔海莉, 刘美芹, 雷庆哲, 熊丹, 段旭良, 程堂仁, 王莉, 胡海英, 金莹, 曲红, 石娟, 张玲, 王丰俊, 姚娜, 陈佳, 隋金玲, 孙月琴, 李莉, 郑彩霞, 周燕, 续九如, 李凤兰, 张香, 骆有庆, 冯秀兰, 郭锐, 孙爱东, 田呈明, 冯菁, 张德权, 李云, 张志毅, 赵亚美, 骆有庆, 尹伟伦, 阎伟, 陈发菊, 张艳霞, 尹伟伦, 王建中, 武彦文, 沈昕, 陆海, 路端正, 陈晓阳, 康向阳, 吴晓成, 孙爱东, 蒋湘宁, 高述民, 史玲玲, 姜金仲, 李忠秋, 梁华军, 王华芳, 郑永唐, 王晓东, 骆有庆, 赵蕾, 武海卫, 郝俊, 马钦彦, 安新民, 卢存福, 梁宏伟, 骆有庆, 胡晓丹, 沈繁宜, 阎晓磊, 胡德夫, 王百田, 张志翔, 崔彬彬
    , 王华芳, 谢磊, 高荣孚, 邹坤, 赵兵, 王瑛, 李凯, 王冬梅, 王晓楠, 于京民2, 冯仲科, 吴坚, 尹伟伦, 骈瑞琪, 严晓素, 王建中, 郭晓萍, 冯晓峰, 王玉兵, 温秀凤3, 刘玉军, 丁霞, 张兴杰, 陶凤杰, 王玉春, 孙建华, 张庆, 刘玉军, 李镇宇, 李凤兰, 王民中, 刘艳, 杨伟光, 沈应柏, 林善枝, 陈卫平, 呼晓姝, 汪植, 马建海, 付瑞海, 赵新丽, 蒋平.  重组毛白杨4-香豆酸:辅酶A连接酶的酶学性质研究 . 北京林业大学学报, 2007, 29(5): 62-66.
    [19] 杨平, 高黎, 李瑞, 王芳, 黄荣凤, 郑小贤, 白岗栓, 胡胜华, 毛俊娟, 何亚平, 周永学, 张莉俊, 颜绍馗, 胡万良, 殷亚方, 袁怀文, 魏潇潇, 张璧光, 秦爱光, 王费新, 吴彩燕, 刘杏娥, 邓小文, 张洪江, 王兆印, 杜社妮, 张岩, 崔赛华, 王正, 王晓欢, 王胜华, 常旭, NagaoHirofumi, 李猛, 费世民, 刘燕, 赵天忠, 樊军锋, 王小青, 谭学仁, 张克斌, 罗晓芳, 戴思兰, 汪思龙, 孙向阳, 乔建平, 李昀, 张占雄, KatoHideo, 江泽慧, 徐嘉, 张旭, 陈放, 韩士杰, , 王海燕, 刘云芳, 江玉林, 高荣孚, 范冰, 龚月桦, 张双保, 孔祥文, 李华, 杨培华, 常亮, 李媛良, 陈秀明, 丁磊, 侯喜录, 陈宗伟, , 刘秀英, 任海青, 郭树花, IdoHirofumi, 李晓峰, 薛岩, , 徐庆祥, 高建社, 费本华, 李考学, , 蒋俊明, 张代贵, 陈学平, 张桂兰, 刘永红, 王晓东, 涂代伦, 续九如, 李雪峰, , 金鑫, , 张红丽, , 丁国权, .  毛白杨巯基蛋白酶抑制剂基因cDNA的克隆及序列分析 . 北京林业大学学报, 2007, 29(6): 23-28.
    [20] 李绍才, 陈文汇, 范丙友, 朱教君, 金小娟, 时尽书, 吕建雄, 翟明普, 胡晓丽, 李世东, 孙晓梅, 王玉杰, 高峻, 谭伟, 窦军霞, 肖生春, 李发东, 杨振德, 潘存德, 颜容, 南海龙, 张冰玉, 徐双民, 张宇清, 周春江, 康宏樟, 冯仲科, 谢益民, 张一平, 三乃, 孟平, 韩海荣, 李建章, 刘红霞, 田小青, 孙海龙, 张守攻, 刘俊昌, 师瑞峰, 骆秀琴, 王云琦, 朱清科, 宋献方, 胡诗宇, 苏晓华, 肖洪浪, 蔡怀, 岳良松, 王笑山, 吴斌, 陆海, 马钦彦, 李义良, 赵博光, 姜伟, 杨志荣, 张雁, 周文瑞, 蒋佳荔, 刘昌明, 齐实, 齐实, 赵双菊, 李智辉, 何磊, 张劲松, 蒲俊文, 张永安, 宋清海, 蒋湘宁, 赵有科, 伊力塔, 朱金兆, 姚山, 葛颂, 齐力旺, 张德荣, 张岩, 于静洁, 刘元, 褚建民, 石丽萍, 杨聪, 吕守芳, 吴庆利, 曲良建, 康峰峰, 马超德, 崔保山, 刘鑫宇, 王玉珠, 王建华, 朱林峰, 刘相超, 胡堃, 田颖川, 唐常源.  毛白杨4-香豆酸: 辅酶A连接酶可溶性原核表达及活性检测 . 北京林业大学学报, 2006, 28(2): 1-8.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  675
  • HTML全文浏览量:  106
  • PDF下载量:  61
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  1900-01-01
  • 修回日期:  1900-01-01
  • 刊出日期:  2013-01-30

毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析

摘要: 以毛白杨总RNA为模板反转录得到cDNA,克隆获得抗坏血酸过氧化物酶基因家族中的一个成员PtAPX2 864 bp的编码序列。该基因编码的蛋白包含287个氨基酸,理论分子质量为3178 ku,C末端包含锚定于过氧化物酶体跨膜结构域,推断其为过氧化物酶体定位蛋白。构建了PtAPX2原核表达载体,在大肠杆菌中表达获得了纯化的重组蛋白,并对其进行了酶学性质分析。PtAPX2对抗坏血酸的Km值为 (1.37±0.22) mmol/L,Vmax值为 (3.95±0.46) mmol/(L•min•mg);对H2O2的Km值为 (0.026±0.003) mmol/L,Vmax值为 (1.27±0.03) mmol/(L•min•mg);该酶在28 ℃,pH 7.0~7.4时活性最高。实时荧光定量PCR分析表明,PtAPX2在杨树老叶叶肉中表达量最高。对PtAPX2亚细胞定位、底物结合特征、酶学性质及组织特异性表达的分析加深了对木本植物抗氧化机理的认识。

English Abstract

潘翔, 李娜, 李印军, 魏弘宜, 张蕾, 陆海. 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析[J]. 北京林业大学学报, 2013, 35(1): 36-44.
引用本文: 潘翔, 李娜, 李印军, 魏弘宜, 张蕾, 陆海. 毛白杨抗坏血酸过氧化物酶基因PtAPX2的克隆表达及分析[J]. 北京林业大学学报, 2013, 35(1): 36-44.
PAN Xiang, LI Na, LI Yin-jun, WEI Hong-yi, ZHANG Lei, LU Hai. Cloning expression and characterization of an ascorbate peroxidase gene PtAPX2 from Populus tomentosa.[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2013, 35(1): 36-44.
Citation: PAN Xiang, LI Na, LI Yin-jun, WEI Hong-yi, ZHANG Lei, LU Hai. Cloning expression and characterization of an ascorbate peroxidase gene PtAPX2 from Populus tomentosa.[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2013, 35(1): 36-44.

目录

    /

    返回文章
    返回