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红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究

程嘉莉 马江 肖爱华 朱仲龙 桑子阳 马履一

程嘉莉, 马江, 肖爱华, 朱仲龙, 桑子阳, 马履一. 红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究[J]. 北京林业大学学报, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
引用本文: 程嘉莉, 马江, 肖爱华, 朱仲龙, 桑子阳, 马履一. 红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究[J]. 北京林业大学学报, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
Cheng Jiali, Ma Jiang, Xiao Aihua, Zhu Zhonglong, Sang Ziyang, Ma Lüyi. Extraction, antioxidant and antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
Citation: Cheng Jiali, Ma Jiang, Xiao Aihua, Zhu Zhonglong, Sang Ziyang, Ma Lüyi. Extraction, antioxidant and antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249

红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究

doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
基金项目: 林业公益性行业科研专项(201504704)
详细信息
    作者简介:

    程嘉莉。主要研究方向:红花玉兰植物化学。Email:Chengjiali@bjfu.edu.cn 地址:100083 北京市海淀区清华东路35号北京林业大学林学院

    通讯作者:

    马履一,教授,博士生导师。主要研究方向:森林培育。Email:maluyi@bjfu.edu.cn 地址:同上

  • 中图分类号: TS201

Extraction, antioxidant and antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis

  • 摘要: 目的研究红花玉兰花蕾挥发油的萃取工艺,并对其化学组成、抗氧化及抗菌活性进行鉴定和评价,旨在为红花玉兰花蕾挥发油的萃取建立一套可行的工艺体系,并为其后续的开发应用提供技术支持和理论参考。方法以‘娇红1号’红花玉兰阴干花蕾为原料,在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化超临界CO2萃取工艺,结合自动化质谱解卷积和保留指数对最佳工艺条件下得到的挥发油进行成分定性和定量;采用DPPH自由基清除法和还原能力法评价挥发油抗氧化活性,纸片扩散法和微量肉汤稀释法评价挥发油抗菌活性。结果阴干预处理条件下,红花玉兰花蕾挥发油萃取的最佳条件为萃取温度47 ℃,萃取压力40.7 MPa,动态萃取时间102 min,该条件下挥发油的萃取率为(1.217 ± 0.014)%。GC-MS共鉴定出30种化学成分,占检测到的挥发油总量的70.65%。DPPH自由基清除法测定得到挥发油IC50值为12.82 mg/mL AEAC值为198.64 mg,表明挥发油具有一定的抗氧化活性,还原力测定也得到了这一结果。抗菌试验表明,挥发油对4种供试菌抑制作用强弱依次为金黄色葡萄球菌 > 枯草芽孢杆菌 > 大肠杆菌 > 鼠伤寒沙门氏菌。结论首次建立了红花玉兰阴干花蕾挥发油的超临界CO2萃取工艺,确定了该工艺条件下挥发油的主要成分,并验证其具有一定的抗氧化和抗菌活性。
  • 图  1  3种因素对红花玉兰花蕾挥发油萃取率影响的单因素试验结果

    字母不同表示各因素对挥发油萃取率影响差异显著(P < 0.05)。Different letters indicate that the effects of various factors on the extraction rate of essential oils are significantly different (P < 0.05).

    Figure  1.  Single factor experiment results of three factors on extraction yield of essential oils from the buds of Magnolia wufengens

    图  2  红花玉兰花蕾挥发油GCMS总离子流图

    Figure  2.  Total ion current map of essential oils from the buds of M. wufengensis

    表  1  响应面试验设计方案及结果

    Table  1.   Design and results of response surface experiments

    试验号
    Experiment No.
    萃取温度
    Extraction temperature/℃
    萃取压力
    Extraction pressure/MPa
    动态萃取时间
    Dynamic extraction time/min
    挥发油萃取率
    Extraction yield of essential oil/%
    1 − 1 (40) 0 (40) − 1 (60) 1.034
    2 − 1 0 1 (120) 1.091
    3 0 (45) 0 0 (90) 1.207
    4 0 1 (45) − 1 1.116
    5 1 (50) 0 − 1 1.145
    6 0 0 0 1.203
    7 − 1 1 0 1.066
    8 0 − 1 (35) 1 1.177
    9 0 1 1 1.172
    10 1 0 1 1.173
    11 1 1 0 1.178
    12 1 − 1 0 1.126
    13 0 0 0 1.218
    14 0 − 1 − 1 1.103
    15 − 1 − 1 0 1.048
    注:括号内数字表示各编码值代表的实际参数值。Note:the numbers in parentheses represent the actual parameter values represented by each coded value.
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    表  2  回归模型方差分析及显著性检验

    Table  2.   Variance analysis on regression models and significance test

    方差来源
    Source of variance
    平方和
    Sum of squares
    自由度
    DF
    均方
    Mean square
    F
    F value
    P
    P value
    模型 Model 0.048 9 5.357 × 10− 3 32.39 0.000 7
    A 0.018 1 0.018 110.77 0.000 1
    B 7.508 × 10− 4 1 7.508 × 10− 4 4.54 0.086 3
    C 5.784 × 10− 3 1 5.784 × 10− 3 34.97 0.002 0
    AB 2.907 × 10− 4 1 2.907 × 10− 4 1.76 0.242 2
    AC 2.088 × 10− 4 1 2.088 × 10− 4 1.26 0.312 2
    BC 7.921 × 10− 5 1 7.921 × 10− 5 0.48 0.519 7
    A2 0.017 1 0.017 103.24 0.000 2
    B2 5.062 × 10− 3 1 5.062 × 10− 3 30.61 0.002 6
    C2 3.407 × 10− 3 1 3.407 × 10− 3 20.60 0.006 2
    残差 Residual 8.268 × 10− 4 5 1.654 × 10− 4
    失拟项 Lack of fit 6.957 × 10− 4 3 2.319 × 10− 4 3.54 0.228 3
    纯误差 Pure error 1.312 × 10− 4 2 6.559 × 10− 5
    总变异 Total variation 0.049 14
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    表  3  红花玉兰花蕾挥发油化学成分

    Table  3.   Chemical compositions of essential oils from the buds of Magnolia wufengensis

    序号
    No.
    化合物名称
    Compound name
    保留时间
    Retention time/min
    aRI/bRI相对含量
    Relative content/%
    1 8-羟基芳樟醇 8-Hydroxylinalool 5.733 1 364/1 361 0.08
    2 反式橙花叔醇 Nerolidol 8.21 1 570/1 564 0.06
    3 3,4-二甲氧基苯甲酸甲酯
    Benzoic acid, 3,4-dimethoxy-, methyl ester
    8.535 1 597/1 592 0.13
    4 石竹烯氧化物 Caryophyllene oxide 8.636 1 606/1 581 0.14
    5 脱氢风毛菊内脂 Dehydrosaussurea lactone 11.364 1 856/1 838 0.19
    6 苯甲酸苯乙酯 Benzoic acid, 2-phenylethyl ester 11.534 1 872/1 856 0.06
    7 十九烷 Nonadecane 11.822 1 900/1 900 0.23
    8 二十烷 Eicosane 12.806 2 000/2 000 0.35
    9 二十一烷 Heneicosane 13.754 2 100/2 100 5.38
    10 二十二烷 Docosane 14.647 2 200/2 200 1.61
    11 裂叶苣荚莱内酯 Santamarine 14.72 2 209/2 227 0.36
    12 二十烷醛 Eicosanal 14.894 2 229/2 221 0.24
    13 喘诺木烯内酯 Reynosin 14.994 2 241/2 266 0.22
    14 诱虫烯 9-Tricosene,(9Z)- 15.305 2 277/2 272 0.35
    15 二十三烷 Tricosane 15.521 2 300/2 300 8.77
    16 4H-xanthalongia 15.684 2 322/- 5.41
    17 对甲氧基肉桂酸异辛酯
    2-Ethylhexyl trans-4-methoxycinnamate
    15.776 2 333/2 339 0.07
    18 二十四烷 Tetracosane 16.336 2 400/2 400 1.34
    19 二十二烷醛 Docosanal 16.598 2 434/2 430 0.51
    20 二十五碳烯 Pentacos-1-ene 16.949 2 478/2 488 0.44
    21 二十五烷 Pentacosane 17.142 2 500/2 500 7.79
    22 二十六烷 Hexacosane 17.897 2 600/2 600 0.88
    23 二十四烷醛 Tetracosanal 18.176 2 636/2 632 0.24
    24 二十七碳烯 Heptacos-1-ene 18.565 2 686/2 688 1.44
    25 二十八烷 Octacosane 19.574 2 800/2 800 1.15
    26 二十六烷醛 Hexacosanal 19.979 2 839/2 815 0.47
    27 二十八烷醛 Octacosanal 22.498 3 042/3 039 0.32
    28 维生素E dl-α-Tocopherol 24.232 3 146/3 150 0.21
    29 16-三十一酮 16-Hentriacontanone 27.283 3 291/3 304 7.82
    30 γ-谷淄醇 γ-Sitosterol 28.398 3 332/3 351 24.39
    注:aRI/bRI代表计算所得目标成分的保留指数/谱库中目标成分的保留指数。Note:aRI/bRI represents calculated retention index of target component/retention index of target component in the library.
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    表  4  红花玉兰花蕾挥发油抗氧化活性

    Table  4.   Antioxidant activities of essential oils from Magnolia wufengensis buds

    方法
    Method
    样品
    Sample
    线性回归方程
    Regression equation
    相关系数R2IC50/(mg·mL− 1AEAC /mg
    DPPH自由基清除法
    DPPH free radical scavenging
    挥发油 Essential oils y = 3.478 7x + 5.408 1 0.995 4 12.82 ± 0.243 7 198.64
    抗坏血酸 Ascorbic acid y = 218 4x − 5.609 5 0.998 8 0.025 ± 0.000 7
    还原能力法
    Reducing power
    挥发油 Essential oil y = 0.006x + 0.089 2 0.977 9
    抗坏血酸 Ascorbic acid y = 16.19x + 0.062 0 0.999 8
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    表  5  红花玉兰花蕾挥发油抑菌活性测定结果

    Table  5.   Antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis buds

    细菌 Bacteria species纸片扩散法 Disk diffusion method微量肉汤稀释法 Broth microdilution method
    类别 Category名称 Name挥发油
    Essential oil/mm
    氨苄青霉素 Ampicillin/mmMIC/(mg·mL− 1)MBC/(mg·mL− 1)
    革兰氏阳性
    Gram-positive
    枯草芽孢杆菌 B. subtilis 10.69 ± 1.06 ab 29.83 ± 0.88 b 12.5 > 25
    金黄色葡萄球菌
    S. aureus
    12.22 ± 0.83 a 37.01 ± 1.70 a 12.5
    革兰氏阴性
    Gram-negative
    鼠伤寒沙门氏菌
    S. typhimurium
    8.26 ± 0.34 b 19.41 ± 0.92 c 25
    大肠杆菌 E. coli 8.99 ± 0.38 b 14.29 ± 0.43 d 25
    注:字母不同表示氨苄或挥发油对不同细菌抑制作用差异显著(P < 0.05)。Note: different letters indicate that the inhibitory effects of ampicillin or essential oils on different bacteria are significantly different (P < 0.05).
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    , 王瑛, 王华芳, 于京民2, 刘玉军, 尹伟伦, 王建中, 王晓楠, 张志翔, 孙建华, 张兴杰, 沈应柏, 李镇宇, 陈卫平, 张庆, 王民中, 王玉春, 丁霞, 林善枝, 刘艳, 李凤兰, 刘玉军, 呼晓姝, 陶凤杰, 杨伟光, 汪植, 蒋平, 马建海, 付瑞海, 赵新丽.  苹果多酚的超声波提取及抗氧化作用研究 . 北京林业大学学报, 2007, 29(5): 137-141.
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    , 冯仲科, 严晓素, 尹伟伦, 邹坤, 呼晓姝, 刘艳, 沈应柏, 杨伟光, 陶凤杰, 丁霞, 陈卫平, 王民中, 孙建华, 刘玉军, 李凤兰, 王玉春, 张庆, 张兴杰, 林善枝, 李镇宇, 蒋平, 赵新丽, 马建海, 付瑞海, 汪植.  响应面法优化超声波辅助提取桑叶多糖的工艺研究 . 北京林业大学学报, 2007, 29(5): 142-146.
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出版历程
  • 收稿日期:  2019-06-03
  • 修回日期:  2019-06-14
  • 网络出版日期:  2020-01-04
  • 刊出日期:  2020-03-03

红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究

doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
    基金项目:  林业公益性行业科研专项(201504704)
    作者简介:

    程嘉莉。主要研究方向:红花玉兰植物化学。Email:Chengjiali@bjfu.edu.cn 地址:100083 北京市海淀区清华东路35号北京林业大学林学院

    通讯作者: 马履一,教授,博士生导师。主要研究方向:森林培育。Email:maluyi@bjfu.edu.cn 地址:同上
  • 中图分类号: TS201

摘要: 目的研究红花玉兰花蕾挥发油的萃取工艺,并对其化学组成、抗氧化及抗菌活性进行鉴定和评价,旨在为红花玉兰花蕾挥发油的萃取建立一套可行的工艺体系,并为其后续的开发应用提供技术支持和理论参考。方法以‘娇红1号’红花玉兰阴干花蕾为原料,在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化超临界CO2萃取工艺,结合自动化质谱解卷积和保留指数对最佳工艺条件下得到的挥发油进行成分定性和定量;采用DPPH自由基清除法和还原能力法评价挥发油抗氧化活性,纸片扩散法和微量肉汤稀释法评价挥发油抗菌活性。结果阴干预处理条件下,红花玉兰花蕾挥发油萃取的最佳条件为萃取温度47 ℃,萃取压力40.7 MPa,动态萃取时间102 min,该条件下挥发油的萃取率为(1.217 ± 0.014)%。GC-MS共鉴定出30种化学成分,占检测到的挥发油总量的70.65%。DPPH自由基清除法测定得到挥发油IC50值为12.82 mg/mL AEAC值为198.64 mg,表明挥发油具有一定的抗氧化活性,还原力测定也得到了这一结果。抗菌试验表明,挥发油对4种供试菌抑制作用强弱依次为金黄色葡萄球菌 > 枯草芽孢杆菌 > 大肠杆菌 > 鼠伤寒沙门氏菌。结论首次建立了红花玉兰阴干花蕾挥发油的超临界CO2萃取工艺,确定了该工艺条件下挥发油的主要成分,并验证其具有一定的抗氧化和抗菌活性。

English Abstract

程嘉莉, 马江, 肖爱华, 朱仲龙, 桑子阳, 马履一. 红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究[J]. 北京林业大学学报, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
引用本文: 程嘉莉, 马江, 肖爱华, 朱仲龙, 桑子阳, 马履一. 红花玉兰挥发油萃取及抗氧化、抗菌活性研究[J]. 北京林业大学学报, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
Cheng Jiali, Ma Jiang, Xiao Aihua, Zhu Zhonglong, Sang Ziyang, Ma Lüyi. Extraction, antioxidant and antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
Citation: Cheng Jiali, Ma Jiang, Xiao Aihua, Zhu Zhonglong, Sang Ziyang, Ma Lüyi. Extraction, antioxidant and antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2020, 42(2): 96-105. doi: 10.12171/j.1000-1522.20190249
  • 挥发油是芳香植物中萃取出的一类重要活性物质,具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗肿瘤、抗胆碱酯酶等作用[1-2]。近年来由于消费者对合成添加剂表现出的毒理效应和细菌耐药性的质疑和排斥日益增强,人们迫切寻找既安全又高效,同时还具有良好感官品质的抗氧化剂和抗菌剂的天然替代品[3]。植物挥发油大多无毒且有着合成香料无法替代的独特芳香,并且大量研究均表明挥发油具有良好的抗氧化和抗菌活性。如荒野蒿(Artemisia campestris)和腓尼基桧(Juniperus phoenicea)的挥发油较其水醇提取物具有更强的清除过氧化氢自由基能力[4],莪术(Curcuma phaeocaulis)的挥发油清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)能力甚至强于Trolox C[5];圆叶薄荷(Mentha rotundifolia)以及唇萼薄荷(M. pulegium)的挥发油对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均具有良好的抑制作用[6-7]。挥发油同时满足了消费者对功能和感官的双重需求,因此被认为是合成添加剂理想的潜在替代品,这也促使了挥发油的萃取工艺及其相关生理活性研究成为近年来的热点之一。

    目前常用的挥发油提取方法主要有水蒸气蒸馏法、索氏提取法、超声萃取法、微波萃取法和超临界CO2萃取法等。相较于其他方法,超临界CO2萃取法具有安全无毒,高萃取率,可在室温下操作,避免热敏性成分氧化及逸散,最大限度地保持挥发油天然活性的特性[8]。因此,立足于挥发油的萃取率、品质以及操作便捷性等方面,选择超临界CO2萃取法作为红花玉兰花蕾挥发油萃取的理想方法。另外,芳香植物中挥发油的萃取率普遍较低,一般约为0.001% ~ 10%,少数可达到20%[9],而超临界CO2萃取过程中,设置的参数条件会显著影响挥发油萃取的数量和质量,为满足挥发油实际应用所需,对超临界CO2萃取条件进行的探索就尤为重要。

    红花玉兰(Magnolia wufengensis)是木兰科(Magnoliaceae)木兰属(Magnolia)新种[10],原始群落仅分布于湖北省五峰县海拔1 400 ~ 2 000 m次生林中,花期在3月中下旬—4月中旬,花型优美,花色艳丽,并有着不同于其他植物独特的浓郁芳香[11]。目前已建立苗木繁育、栽培示范推广基地233.3 hm2,大苗培育基地853.3 hm2,繁育、栽培红花玉兰及其新品种苗木400万株,并在北京、江苏、河南、广东等17个省、直辖市开展了红花玉兰引种栽培和技术推广[12]。多处研究已报道木兰科植物的挥发油成分具有抗氧化、抗菌等活性,如张婷婷等[13]和Morshedloo等[14]分别对辛夷(Magnolia liliflora)、广玉兰(Magnolia grandiflora)的挥发油进行了生理活性的测定,明确了木兰属植物挥发油具有一定的抗氧化及抗菌活性,且辛夷挥发油对大肠杆菌抑制作用较强。因此,红花玉兰花蕾挥发油作为人工合成抗氧化剂和抗菌剂的天然替代品具有极为广阔的开发应用前景。本试验通过单因素试验结合响应面分析法对超临界CO2萃取工艺进行探索,基于自动化质谱解卷积和保留指数对最佳萃取条件下获得的挥发油成分进行了定性和定量分析。另外,采用DPPH自由基清除法、还原能力测定法评价了红花玉兰花蕾挥发油的抗氧化活性,以滤纸片扩散法和微量肉汤稀释法评价了其体外抗菌活性。本研究初步补充了红花玉兰花蕾挥发油相关应用潜力信息,为红花玉兰花蕾挥发油的萃取和应用奠定了理论和技术基础。

    • 2018年3月上旬上午于湖北省五峰县仁和坪采集红花玉兰‘娇红1号’花蕾,除去枝梗后在室内通风避光处阴干至重量恒定,用粉碎机粉碎后过标准筛,取20 ~ 40目样品封袋保存于干燥器中备用。

      大肠杆菌(Escherichia coli ATCC25922)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus ATCC25923)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium ATCC14028)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis ATCC6633)(上海鲁微科技有限公司),C7 ~ C40正构烷烃混标(o2si标准品公司,美国),DPPH(Sigma公司,美国),NaH2PO4·2H2O、Na2HPO4·12H2O、三氯乙酸、抗坏血酸标准品、吐温-80、氨苄青霉素、刃天青(阿拉丁试剂有限公司),铁氰化钾、氯化铁、正己烷(色谱纯)(北京化工厂有限责任公司),其余试剂均为分析纯。

    • 高速万能粉碎机(天津泰斯特仪器有限公司),超临界CO2萃取装置(Applied Separations公司,美国),旋转蒸发仪(Heidolph公司,德国),Agilent 7890B-5977A气相色谱质谱联用仪(Agilent科技有限公司,美国),超声波清洗机(宁波新芝生物科技股份有限公司),Lambda35紫外分光光度计(PerkinElmer公司,美国),恒温培养箱(上海博迅医疗生物仪器股份有限公司)等。

    • 固定静态萃取时间90 min,CO2流速2.5 mL/min,分别以萃取温度(35、40、45、50、55 ℃),萃取压力(25、30、35、40、45 MPa)和动态萃取时间(30、60、90、120、150 min)为单因素进行萃取试验,所得粗提物用正己烷溶解、过滤后,用旋转蒸发仪在35 ℃旋至纯净,得到乳黄色具芳香气味的挥发油,称质量并计算萃取率,平行试验3次,分析各因素对红花玉兰花蕾挥发油萃取率的影响。

      $$ {\text{挥发油萃取率}}{\rm{ = }}\frac{{{\text{挥发油质量}}}}{{{\text{样品粉末质量}}}} \times 100\% $$
    • 根据单因素试验获得的各因素适宜水平值,应用Design-Expert 10软件中的Box-Behnken设计创建以萃取压力、萃取温度、动态萃取时间为自变量,红花玉兰花蕾挥发油萃取率为响应值的3因素3水平试验,并根据响应面试验结果确定超临界CO2萃取红花玉兰花蕾挥发油萃取的最佳工艺条件。响应面试验因素与水平见表1

      表 1  响应面试验设计方案及结果

      Table 1.  Design and results of response surface experiments

      试验号
      Experiment No.
      萃取温度
      Extraction temperature/℃
      萃取压力
      Extraction pressure/MPa
      动态萃取时间
      Dynamic extraction time/min
      挥发油萃取率
      Extraction yield of essential oil/%
      1 − 1 (40) 0 (40) − 1 (60) 1.034
      2 − 1 0 1 (120) 1.091
      3 0 (45) 0 0 (90) 1.207
      4 0 1 (45) − 1 1.116
      5 1 (50) 0 − 1 1.145
      6 0 0 0 1.203
      7 − 1 1 0 1.066
      8 0 − 1 (35) 1 1.177
      9 0 1 1 1.172
      10 1 0 1 1.173
      11 1 1 0 1.178
      12 1 − 1 0 1.126
      13 0 0 0 1.218
      14 0 − 1 − 1 1.103
      15 − 1 − 1 0 1.048
      注:括号内数字表示各编码值代表的实际参数值。Note:the numbers in parentheses represent the actual parameter values represented by each coded value.
    • 将1 mg/mL的C7 ~ C40正构烷烃混标用正己烷稀释,待GC-MS检测。

    • GC条件:HP-5M石英毛细管柱(30 m × 250 μm × 0.25 μm);载气为高纯氦气(He),载气流速1 mL/min;进样量1 μL,分流比10∶1;进样口温度280 ℃;程序升温:初始温度120 ℃,保持2 min,以10 ℃/min升至280 ℃,保持20 min。

      MS条件:电子电离源(70 eV);离子源温度230 ℃;四级杆温度150 ℃;传输线温度280 ℃;溶剂延迟时间3 min;质量扫描范围m/z:35 ~ 550 u。

    • 将GC-MS采集到的总离子流图采用自动化质谱解卷积进行处理,以NIST14.L标准谱库中匹配度最高的值为结果,结合正构烷烃混标测定结果计算目标成分的保留指数(aRI),并与谱库中的保留指数(bRI)进行对比分析,以峰面积百分比进行初步定量。

      科瓦茨保留指数(RI)按以下公式计算[13]

      $${\rm{RI}} = 100{\textit{z}} + \frac{{100 \times ({T_{{\rm{R}}x}} - {T_{{\rm{R}}{\textit{z}}}})}}{{{T_{{\rm{R}}({\textit{z}} + 1)}} - {T_{{\rm{R}}{\textit{z}}}}}}$$

      式中:TRx为组分保留时间;TRzTR(z + 1)分别为碳数zz + 1正构烷烃的保留时间,且TRz < TRx < TR(z + 1)

    • 参照Cherrat等[15]的方法并做优化。将红花玉兰花蕾挥发油用无水乙醇稀释成3、6、9、12和15 mg/mL样液,阳性对照抗坏血酸对照稀释为0.004、0.008、0.012、0.016、0.020 mg/mL样液,以1 mL乙醇作空白对照。分别吸取上述各浓度样液1 mL,加入3 mL质量浓度为0.1 mM的DPPH-乙醇溶液,室温黑暗条件下振荡60 min,于波长517 nm处测定其吸光度,用乙醇组调零。平行试验3次,所有试剂现配现用。

      按下列公式计算自由基清除率I

      $${{I = }}\frac{{{{{A}}_{\rm{0}}}{\rm{ - }}{{{A}}_{\rm{S}}}}}{{{{{A}}_{\rm{0}}}}} \times {\rm{100\% }}$$

      式中:A0为空白样液吸光度;AS为挥发油和抗坏血酸样液吸光度。

      测定结果建立DPPH自由基清除率−样品浓度回归模型,并计算半数抑制浓度(IC50)。由于IC50受DPPH自由基初始浓度影响,目前各文献中初始浓度差异较大,无法统一比较,因此采用抗坏血酸当量(ascorbic acid equivalent antioxidant capacity,AEAC)来消除这一干扰。

      AEAC计算公式如下[16]

      $${\rm{AEAC = }}\frac{{{\rm{I}}{{\rm{C}}_{{\rm{50(A)}}}}}}{{{\rm{I}}{{\rm{C}}_{{\rm{50(S)}}}}}} \times {\rm{1}}{{\rm{0}}^{\rm{5}}}$$

      式中:IC50(A)为抗坏血酸半数抑制浓度,IC50(S)为挥发油半数抑制浓度。

    • 参照Harkat-Madouri等[17]的方法并做优化。将红花玉兰花蕾挥发油用无水乙醇稀释成15、30、45、60、75 mg/mL样液,阳性对照抗坏血酸对照稀释为0.004、0.008、0.012、0.016、0.020 mg/mL样液。分别吸取上述各浓度样液1 mL,加入1 mL磷酸缓冲液(0.2 M,pH = 6.6)和1 mL铁氰化钾溶液(1%),黑暗中50 ℃水浴加热20 min,快速冷却后加入1 mL三氯乙酸溶液(10%,w/v),3 000 g离心10 min后,取1.5 mL上清液,加入1.5 mL蒸馏水和0.3 mL氯化铁溶液(0.1%)充分混合,静置10 min后,在波长700 nm处测定吸光度,用乙醇组调零。平行试验3次,所有试剂现配现用。

    • 参照Abdelli等[7]的方法并做优化。红花玉兰花蕾挥发油用吐温-80溶液稀释至50 mg/mL,以5%吐温-80溶液为阳性对照,5 μg/disc氨苄青霉素为阴性对照。活化后的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌和枯草芽孢杆菌通过平板菌落计数法调整到107 CFU/mL。在超净工作台中将MH(Mueller Hinton)培养基倒入90 mm平板中,凝固后分别加入的4种菌液100 μL,均匀涂布并干燥10 min后,每个平板上均匀放置3个6 mm无菌药敏纸片,依次滴加10 μL挥发油样液、5% 吐温-80样液和5 μg/disc氨苄青霉素样液,在超净工作台上扩散半小时后,移至37 ℃恒温培养箱中培养24 h,平行试验3次,记录抑菌圈(diameters of inhibition zones,DIZ)的大小,取其平均值,单位为mm。

    • 参照Almadiy等[3]的方法并做优化。在无菌96孔板第1 ~ 10列加入100 μL灭菌冷却至室温的MH肉汤,在第1列加入50 mg/mL挥发油样液100 μL后对溶液进行2倍连续稀释,第11孔以吐温-80溶液(5%)做阴性对照,第12孔以氨苄青霉素(0.5 mg/mL)为阳性对照,然后在每一孔中加入调整为107 CFU/mL的菌悬液100 μL,37 ℃摇床振荡培养22 h后,加入50 μL刃天青溶液(0.2 g/L),继续振荡培养2 h,每个菌种设置3组平行。刃天青本身为蓝色,当孔中有细菌生长则呈红色,以此确定挥发油的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)。从蓝色96孔板内移取100 μL溶液涂布平板,置于37 ℃恒温培养箱中培养24 h,所涂平板完全没有测试菌生长的最低浓度即认定为最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。

    • 超临界CO2萃取过程中各因素的微小变化都会影响被萃取物有效成分的萃取结果,综合考虑挥发油萃取率和萃取成分对影响因素的响应程度以及因素的可控性,选择萃取温度、萃取压力和动态萃取时间3个因素来评价它们对红花玉兰阴干花蕾挥发油萃取效果的影响。

      单因素试验结果图1所示,以萃取压力30 MPa,动态萃取时间120 min为初始固定条件,随着萃取温度(35、40、45、50、55 ℃)的升高,挥发油萃取率先增大后平缓地减小,在45 ℃时达到最大值,为(1.160 0 ± 0.005 2)%。这可能是由于萃取过程中温度的升高增加了溶质的蒸气压和扩散能力,使其在超临界CO2中的溶解度上升;当温度超过临界值后,随着温度的升高溶质的挥发度和扩散度依然增加,但难以补偿CO2流体密度下降造成的溶质溶解度下降[18],此外伴随温度的升高,杂质溶解度也会增加从而增大分离纯化的复杂性,降低溶质的收率以及造成一些不稳定成分的变性、分解和失效,因此选定合适萃取温度为45 ℃。

      图  1  3种因素对红花玉兰花蕾挥发油萃取率影响的单因素试验结果

      Figure 1.  Single factor experiment results of three factors on extraction yield of essential oils from the buds of Magnolia wufengens

      以萃取温度45 ℃,动态萃取时间120 min为固定条件,萃取压力(25、30、35、40、45 MPa)的加强使得挥发油萃取率也呈现先增大后减小的变化趋势,并在40 MPa时达到最大值(1.229 9 ± 0.016 1)%。主要原因可能是萃取过程中压力的加强可显著增加CO2流体密度,从而增大溶质的溶解度,提高萃取效率[19];而当压力超过临界值后,粉末易被压缩成块,与CO2流体的接触面积减少,反而会导致溶质溶解度下降,萃取收率也随之下降,因此选定合适萃取压力为40 MPa。

      以萃取温度45 ℃,萃取压力40 MPa为固定条件,随着动态萃取时间(30、60、90、120、150 min)增加,挥发油萃取率不断增大,在90 min达到(1.201 3 ± 0.008 1)%后增长逐渐平缓。这可能是因为动态萃取时间增加有利于CO2流体与溶质之间达到溶解平衡,从而提高萃取收率,但随着溶质中有效成分的减少,增加动态萃取时间,萃取收率增加缓慢且能耗增加,因此综合考虑时间和能耗选定90 min为合适的动态萃取时间。

    • 利用Design Expert 10软件对响应面试验得到的结果进行多元回归拟合,结果如表2所示,得到挥发油萃取率对萃取温度(A),萃取压力(B),动态萃取时间(C)的二次多元回归方程为Y = 1.21+0.048A + 0.009 687B + 0.027C + 0.008 525AB − 0.007 225AC − 0.004 45BC − 0.068A2 − 0.037B2 − 0.03C2。方程中二次项系数均为负值表明红花玉兰花蕾挥发油萃取率具极大值点,可以进行优化分析;一次项系数绝对值表明对红花玉兰花蕾挥发油萃取率的影响:萃取温度 > 动态萃取时间 > 萃取压力。

      表 2  回归模型方差分析及显著性检验

      Table 2.  Variance analysis on regression models and significance test

      方差来源
      Source of variance
      平方和
      Sum of squares
      自由度
      DF
      均方
      Mean square
      F
      F value
      P
      P value
      模型 Model 0.048 9 5.357 × 10− 3 32.39 0.000 7
      A 0.018 1 0.018 110.77 0.000 1
      B 7.508 × 10− 4 1 7.508 × 10− 4 4.54 0.086 3
      C 5.784 × 10− 3 1 5.784 × 10− 3 34.97 0.002 0
      AB 2.907 × 10− 4 1 2.907 × 10− 4 1.76 0.242 2
      AC 2.088 × 10− 4 1 2.088 × 10− 4 1.26 0.312 2
      BC 7.921 × 10− 5 1 7.921 × 10− 5 0.48 0.519 7
      A2 0.017 1 0.017 103.24 0.000 2
      B2 5.062 × 10− 3 1 5.062 × 10− 3 30.61 0.002 6
      C2 3.407 × 10− 3 1 3.407 × 10− 3 20.60 0.006 2
      残差 Residual 8.268 × 10− 4 5 1.654 × 10− 4
      失拟项 Lack of fit 6.957 × 10− 4 3 2.319 × 10− 4 3.54 0.228 3
      纯误差 Pure error 1.312 × 10− 4 2 6.559 × 10− 5
      总变异 Total variation 0.049 14

      进一步统计分析得到方程模型P < 0.01,表明各组参数得到的挥发油萃取率差异极显著,该模型对红花玉兰花蕾挥发油的萃取具有重要的参考意义,可以用作后续的优化设计;失拟项P > 0.05,差异不显著,表明无失拟因素,该模型在被研究的整个回归区域内拟合较好;多元相关系数R2 = 0.983 1,表明该模型模拟预测值与实际值拟合度良好,能够较好的描述试验结果;信噪比(Adeq Precision)= 17.175,数值较高,变异系数CV = 1.13%,数值较低,表明试验的精确度和精密度高[20];因此该模型可用于对红花玉兰花蕾挥发油萃取率的预测。由软件分析结果得出红花玉兰花蕾挥发油最佳萃取工艺参数为萃取温度47 ℃、萃取压力40.7 MPa、动态萃取时间102 min,结合固定条件静态萃取90 min,CO2流速2.5 mL/min的工艺条件进行验证实验,得到挥发油萃取率为(1.217 ± 0.014)%,与预测值1.224%基本吻合。

    • 由GC-MS总离子流图可知,色谱峰主要集中在14 ~ 30 min(图2),进行自动化质谱解卷积分析处理后,结果如表3所示,从红花玉兰花蕾挥发油中共鉴定出30种化合物,占检测到的挥发性物质总量的70.65%,其中含有甾醇类1种(24.39%),烃类12种(29.73%),酮类1种(7.82%),醛类5种(1.78%),酯类6种(1.03%),而维生素E(0.21%)和醇类2种(0.14%)及其他物质2种(5.55%)。4种主要成分依次为γ-谷甾醇(24.39%)、二十三烷(8.77%)、16-三十一酮(7.82%)、二十五烷(7.79%)。

      图  2  红花玉兰花蕾挥发油GCMS总离子流图

      Figure 2.  Total ion current map of essential oils from the buds of M. wufengensis

      表 3  红花玉兰花蕾挥发油化学成分

      Table 3.  Chemical compositions of essential oils from the buds of Magnolia wufengensis

      序号
      No.
      化合物名称
      Compound name
      保留时间
      Retention time/min
      aRI/bRI相对含量
      Relative content/%
      1 8-羟基芳樟醇 8-Hydroxylinalool 5.733 1 364/1 361 0.08
      2 反式橙花叔醇 Nerolidol 8.21 1 570/1 564 0.06
      3 3,4-二甲氧基苯甲酸甲酯
      Benzoic acid, 3,4-dimethoxy-, methyl ester
      8.535 1 597/1 592 0.13
      4 石竹烯氧化物 Caryophyllene oxide 8.636 1 606/1 581 0.14
      5 脱氢风毛菊内脂 Dehydrosaussurea lactone 11.364 1 856/1 838 0.19
      6 苯甲酸苯乙酯 Benzoic acid, 2-phenylethyl ester 11.534 1 872/1 856 0.06
      7 十九烷 Nonadecane 11.822 1 900/1 900 0.23
      8 二十烷 Eicosane 12.806 2 000/2 000 0.35
      9 二十一烷 Heneicosane 13.754 2 100/2 100 5.38
      10 二十二烷 Docosane 14.647 2 200/2 200 1.61
      11 裂叶苣荚莱内酯 Santamarine 14.72 2 209/2 227 0.36
      12 二十烷醛 Eicosanal 14.894 2 229/2 221 0.24
      13 喘诺木烯内酯 Reynosin 14.994 2 241/2 266 0.22
      14 诱虫烯 9-Tricosene,(9Z)- 15.305 2 277/2 272 0.35
      15 二十三烷 Tricosane 15.521 2 300/2 300 8.77
      16 4H-xanthalongia 15.684 2 322/- 5.41
      17 对甲氧基肉桂酸异辛酯
      2-Ethylhexyl trans-4-methoxycinnamate
      15.776 2 333/2 339 0.07
      18 二十四烷 Tetracosane 16.336 2 400/2 400 1.34
      19 二十二烷醛 Docosanal 16.598 2 434/2 430 0.51
      20 二十五碳烯 Pentacos-1-ene 16.949 2 478/2 488 0.44
      21 二十五烷 Pentacosane 17.142 2 500/2 500 7.79
      22 二十六烷 Hexacosane 17.897 2 600/2 600 0.88
      23 二十四烷醛 Tetracosanal 18.176 2 636/2 632 0.24
      24 二十七碳烯 Heptacos-1-ene 18.565 2 686/2 688 1.44
      25 二十八烷 Octacosane 19.574 2 800/2 800 1.15
      26 二十六烷醛 Hexacosanal 19.979 2 839/2 815 0.47
      27 二十八烷醛 Octacosanal 22.498 3 042/3 039 0.32
      28 维生素E dl-α-Tocopherol 24.232 3 146/3 150 0.21
      29 16-三十一酮 16-Hentriacontanone 27.283 3 291/3 304 7.82
      30 γ-谷淄醇 γ-Sitosterol 28.398 3 332/3 351 24.39
      注:aRI/bRI代表计算所得目标成分的保留指数/谱库中目标成分的保留指数。Note:aRI/bRI represents calculated retention index of target component/retention index of target component in the library.

      以往的研究表明,辛夷挥发油提取率为0.77% ~ 1.05%[13],其中主要成分萜醇类(39.27% ~ 47.43%)和萜烯类(37.74% ~ 41.93%)远高于红花玉兰,但酮(0.47% ~ 2.32%)、醛(0.19% ~ 0.27%)、酯类(0.43% ~ 0.77%)含量较红花玉兰相对低。文献报道,亲缘关系相近的不同树种[13-14]或同一树种不同种源、不同取样部位,土壤(土壤水分、养分等)、气候(温度、湿度、光照时长、降水等)、栽培管理措施等的区别,均会造成植物合成和积累的挥发油存在较大差异,且变异规律也不甚明显[5, 21],这些都是植物对生长环境适应的结果。例如木兰属10个玉兰种的挥发油中共分离和鉴定出特有或非共有成分45种,占挥发油含率的25.5%,且不同树种非共有成分间差异很大,也无明显变异规律[22]。而从不同地区的广玉兰中提取得到的挥发油,其主要成分及含量也被证明存在较大差别,如采自伊朗的广玉兰挥发油主要成分为β-榄香烯(14.3%),牛儿烯(10.3%),大根香叶烯D(7.6%),采自墨西哥的广玉兰主要成分为醋酸冰片酯(20.9%),而采自古巴的广玉兰挥发油则以β-蒎烯(10.5%),香叶醇(7.4%),大根香叶烯D(6.2%)为主[14]。Zheng等[23]对比发现广西单性木兰雄花和雌花的挥发油虽然成分相似但含量存在差异,而两者均与叶片的挥发油存在成分上的显著差异。并且挥发油的含量和成分还与采收时所处发育阶段有关[21]。此外,植物样品在干燥过程中既会导致某些原有成分的损失,也会伴随一些新成分的出现,这些改变主要取决于操作参数和植物的生物学特性,如亲水性成分随水份散失,挥发性成分逸散和氧化[24-26],因此,提取得到的挥发油往往与芳香植物本身成分组成存在一定差异。而挥发油提取方法和参数的差异则会直接导致对挥发油成分选择性的不同,如超临界CO2萃取在较高萃取压力下,对大分子成分的选择性会增强,适当降低压力能增加萜烯类小分子物质的萃取[27]。因此,红花玉兰虽然是木兰属树种,但挥发油含量和成分与其他木兰种存在较大差异,且超临界CO2萃取得到的挥发油中甾醇类等大分子成分含量较高,而萜醇类等小分子成分含量较低,这可能与树种、生长环境、所采样品的发育阶段、干燥和提取方法及参数条件等因素相关。其中相对含量最高的γ-谷甾醇(24.44%)与菜油甾醇(4.83%)是植物甾醇的主要存在形式,具有抗炎、抗癌活性以及降低胆固醇,预防和治疗冠状动脉硬化类心血管疾病等药理作用,被誉为“生命的钥匙”[28],因此红花玉兰的挥发油萃取物在该方面可能具有极其重要的开发和应用价值。

    • DPPH自由基清除法和还原能力法是评价植物提取物体外抗氧化活性最常用的方法,二者通过两个不同的体系来表现提取物抗氧化活性。前一种方法中,DPPH能形成稳定的醇溶性自由基,提取物通过清除这些自由基的能力来反映抗氧化活性,而后一种方法中,提取物则通过还原脂质过氧化过程中产生的中间体,从另一方面反映其抗氧化活性[29]

      表4可知,挥发油和抗坏血酸样品浓度与DPPH自由基清除率(REOs2 = 0.994 5,RVC2 = 0.998 8)、吸光度(REOs2 = 0.977 9,RVC2 = 0.999 8)均呈显著正相关。在DPPH自由基清除法中,IC50数值越小则抗氧化活性越强,而红花玉兰花蕾挥发油的IC50值((12.82 ± 0.243 7)mg/mL)远大于抗坏血酸标准品的IC50值((0.025 ± 0.000 7)mg/mL),且AEAC达198.64 mg,这表明红花玉兰阴干花蕾萃取的挥发油虽然具有一定的抗氧化性,但活性相对较弱。还原能力法中,测定得到挥发油线性回归模型斜率(0.006)远小于抗坏血酸(16.19),同样表明红花玉兰花蕾挥发油的抗氧化活性相对较弱。

      表 4  红花玉兰花蕾挥发油抗氧化活性

      Table 4.  Antioxidant activities of essential oils from Magnolia wufengensis buds

      方法
      Method
      样品
      Sample
      线性回归方程
      Regression equation
      相关系数R2IC50/(mg·mL− 1AEAC /mg
      DPPH自由基清除法
      DPPH free radical scavenging
      挥发油 Essential oils y = 3.478 7x + 5.408 1 0.995 4 12.82 ± 0.243 7 198.64
      抗坏血酸 Ascorbic acid y = 218 4x − 5.609 5 0.998 8 0.025 ± 0.000 7
      还原能力法
      Reducing power
      挥发油 Essential oil y = 0.006x + 0.089 2 0.977 9
      抗坏血酸 Ascorbic acid y = 16.19x + 0.062 0 0.999 8
    • 采用纸片扩散法和微量肉汤稀释法评价红花玉兰阴干花蕾挥发油对4种常见细菌的抗菌活性。由表5可知,红花玉兰花蕾挥发油能在一定程度上抑制细菌的生长,且对革兰氏阳性菌抑制效果强于革兰氏阴性菌,这可能与革兰氏阴性菌细胞壁脂多糖对有效成分的限制有关[6]。纸片扩散法中,50 mg/mL挥发油对4种常见细菌的抑制作用强弱依次为金黄色葡萄球菌 > 枯草芽孢杆菌 > 大肠杆菌 > 鼠伤寒沙门氏菌,抑菌圈直径从(8.26 ± 0.34)mm至(12.22 ± 0.83)mm。5 μg/disc氨苄青霉素对4种细菌的抑制效果表现依次为金黄色葡萄球菌 > 枯草芽孢杆菌 > 鼠伤寒沙门氏菌 > 大肠杆菌,且抑菌圈直径((14.29 ± 0.43) ~ (37.01 ± 1.70)mm)远大于挥发油。微量肉汤稀释法测定的红花玉兰花蕾挥发油抑菌效果与纸片扩散法测定的结果一致。挥发油对金黄色葡萄球菌抑制效果最佳(MIC = 12.5 mg/mL),其次为枯草芽孢杆菌和鼠伤寒沙门氏菌,对大肠杆菌抑制效果最弱(MIC = 25 mg/mL)。

      表 5  红花玉兰花蕾挥发油抑菌活性测定结果

      Table 5.  Antibacterial activities of essential oils from Magnolia wufengensis buds

      细菌 Bacteria species纸片扩散法 Disk diffusion method微量肉汤稀释法 Broth microdilution method
      类别 Category名称 Name挥发油
      Essential oil/mm
      氨苄青霉素 Ampicillin/mmMIC/(mg·mL− 1)MBC/(mg·mL− 1)
      革兰氏阳性
      Gram-positive
      枯草芽孢杆菌 B. subtilis 10.69 ± 1.06 ab 29.83 ± 0.88 b 12.5 > 25
      金黄色葡萄球菌
      S. aureus
      12.22 ± 0.83 a 37.01 ± 1.70 a 12.5
      革兰氏阴性
      Gram-negative
      鼠伤寒沙门氏菌
      S. typhimurium
      8.26 ± 0.34 b 19.41 ± 0.92 c 25
      大肠杆菌 E. coli 8.99 ± 0.38 b 14.29 ± 0.43 d 25
      注:字母不同表示氨苄或挥发油对不同细菌抑制作用差异显著(P < 0.05)。Note: different letters indicate that the inhibitory effects of ampicillin or essential oils on different bacteria are significantly different (P < 0.05).

      已开展的芳香植物挥发油抗菌试验表明,挥发油对革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌抑制作用强弱结果不一,如从12个不同产地的莪术中提取得到的挥发油对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的抑制作用无明显规律[5];而圆叶薄荷和蓍草(Achillea spp.)类的挥发油对革兰氏阳性菌的抑制作用强于革兰氏阴性菌[3, 6],但蓝桉树(Eucalyptus globulus)的挥发油对两种细菌的抑制效果则恰恰相反[17]

      挥发油的抗氧化和抗菌活性取决于其化学组成[30],酚类化合物通常被认为具有较强抗氧化、抗菌活性[31],萜类化合物及其含氧衍生物如萜醇类、酮醛类等在抗氧化和抗菌活性方面也发挥了重要作用,并且单萜类含氧衍生物,尤其是萜醇类,较之单萜和倍半萜对细菌抑制作用更强[7]。挥发油中各成分间存在协同效应,使挥发油整体的抗氧化、抗菌活性强于单个主要成分[3]。红花玉兰花蕾挥发油中萜烯、萜醇以及醛酮类等含量相对较低,而几乎无抗氧化和抗菌效果的烃类[21]含量较高,这既有红花玉兰花蕾挥发油本身成分组成的原因,也有花蕾干燥和萃取过程中有效成分逸散、氧化或未被选择的原因。因此红花玉兰花蕾挥发油具有一定的抗氧化和抗菌活性,但相对较弱。张婷婷等[13]和Morshedloo等[14]分别对辛夷和广玉兰挥发油清除DPPH自由基的能力进行了测定,也得出两者的挥发油具有相对较弱抗氧化活性的结论。

    • 在单因素试验的基础上,结合响应面分析法得到红花玉兰阴干花蕾挥发油超临界CO2萃取的最佳条件为萃取温度47 ℃,萃取压力40.7 MPa,动态萃取时间102 min,该参数下挥发油萃取率为(1.217 ± 0.014)%,研究结果同时表明选定的3个因素对红花玉兰花蕾挥发油萃取率的影响强度依次为:萃取温度 > 动态萃取时间 > 萃取压力。此外,自动化质谱解卷积结合保留指数分析得到红花玉兰花蕾挥发油主要成分为甾醇类(24.39%)和烃类(29.73%),并含有醇类(0.14%)、维生素E(0.21%)以及酮(7.82%)、醛(1.78%)、酯类(1.03%)等成分。抗氧化和抗菌试验表明红花玉兰花蕾挥发油具有一定的抗氧化能力,但活性相对较弱,并且具有广谱抑菌性,且对革兰氏阳性菌抑制效果强于革兰氏阴性菌。若能深入研究影响其成分组成及生理活性的因素,找到提高红花玉兰花蕾挥发油抗氧化、抗菌活性的处理方法,将有助于拓展红花玉兰的经济开发价值,相关后续工作仍有待进一步开展。

参考文献 (31)

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