Effects of fresh seaweed bio-enzymatic organic fertilizer on the growth and soil physicochemical properties of Atraphaxis bracteata
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摘要:目的为提高荒漠沙地植被的存活率和覆盖度，本文以毛乌素沙地西南缘的沙木蓼为研究对象，通过施用鲜海带生物酶解有机液肥，研究其对沙地土壤理化性质和沙木蓼生长及群落物种多样性的影响。方法采用不同梯度的鲜海带生物酶解有机液肥对沙木蓼进行1年的试验，利用土壤水分测定仪测量土壤含水率，凯氏定氮法测定土壤全氮含量，重铬酸钾滴定法测定土壤有机质含量，公式法计算群落物种多样性。结果(1) 该有机液肥有效地增加了土壤0~10 cm层的含水率，且施用冲施肥研究区的土壤含水率较叶面肥研究区的高10.6%。(2)土壤0~20 cm层的全氮和有机质的含量随着施肥量的增加而增加，并在施肥量为15 mL/m2时，达到最高，与对照间差异显著(P < 0.05)，且叶面肥处理的有机质含量远高于冲施肥。(3)该有机液肥有效地促进了沙木蓼的生长，沙木蓼地径、株高和新梢增长量均随着施肥量增加而呈先增加后减小的趋势，在施肥量为6 mL/m2时达到最大，与对照差异显著(P < 0.05)，且冲施肥的效果要比叶面肥更优。(4)该有机液肥增加了沙木蓼群落的物种组成、Margalef物种丰富度指数、Simpson优势度指数和Shannon-Wiener多样性指数。结论鲜海带生物酶解有机液肥能够增加毛乌素沙地土壤水分与养分的含量，促进沙木蓼的生长，有助于毛乌素沙地植被的恢复，更好地发挥其生态效益。Abstract:ObjectiveIn order to improve the survival rate and coverage of desert vegetation, a field experiment by adding fresh seaweed bio-enzymatic liquid organic fertilizer on the Atraphaxis bracteata located in the southwest of Mu Us Desert, Ningxia of northwestern China, was carried out to study its effect on soil physicochemical properties, growth and community species diversity of Atraphaxis bracteata in desert ecosystems.MethodUsing a different gradient of fresh seaweed bio-enzymatic organic fertilizer to conduct a one-year test on Atraphaxis bracteata, the soil moisture was measured by soil moisture meter, soil total nitrogen was measured by Kjeldahl method, soil organic matter was measured by potassium dichromate titration, and species diversity was calculated by formula method.Result(1) Fresh seaweed biological enzyme liquid organic fertilizer can increase soil moisture content in 0-10 cm layer effectively, and the soil moisture content of flush fertilization was 10.6% higher than that of foliar fertilizer application area. (2) The content of soil total nitrogen and organic matter in 0-20 cm layer increased with the increase of fertilizing amount and reached peak value when the fertilizing amount was 15 mL/m2, and there was significant difference compared with control (P < 0.05). The content of organic matter treated with foliar fertilizer was much higher than that of flush fertilizer. (3) The fresh liquid organic fertilizer promoted the growth of Atraphaxis bracteata effectively, the growth of its ground diameter, plant height and new shoot all increased first and then decreased with the increase of fertilizing amount, and reached peak value when the fertilizing amount was 6 mL/m2, and there was significant difference compared with control (P < 0.05). The effect of flush fertilization was better than foliar fertilizer. (4) The fresh seaweed bio-enzymatic liquid organic fertilizer increased the species composition, Margalef species richness index, Simpson dominance index and Shannon-Wiener diversity index of Atraphaxis bracteata.ConclusionFresh seaweed bio-enzymatic liquid organic fertilizer can increase the content of soil moisture and nutrients in Mu Us Desert, promote the growth of Atraphaxis bracteata, contributes to the restoration of vegetation in Mu Us Desert, and then the vegetation can give better play to the ecological benefits.
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青钱柳(Cyclocarya paliurus)是我国特有的药食同源珍稀植物，研究表明其叶片中含有大量有益人体健康的生理活性物质，包括黄酮类和三萜类[1-2]。由于自然资源稀少，且主要分布于自然保护区中，目前主要以发展人工林为主。而随着青钱柳产业化的推进，在栽培上以获取主要次生代谢产物为目标的培育措施和调控技术成为药用青钱柳人工林发展的必然要求。
作为一种木本药用植物，青钱柳的生长和次生代谢物积累是我们需要关注的两个方面，因为生长是产量形成的基础，而次生代谢物的积累量是原料品质的重要保证。但目前关于环境条件对青钱柳生长和次生代谢物积累(尤其是三萜)方面的研究和报道较少。根据已有研究，许多环境因子都对次生代谢有重要影响，其中光照条件被认为是与植物发育及次生代谢关系最为密切的环境因子之一[3-4]。如遮荫处理显著提高了喜树中喜树碱的含量[5]。而且由于植物次生代谢物在提高植物抗逆性和协调与环境关系上的重要作用，它们的合成和积累与初级代谢产物相比更易受到环境条件的影响[6-7]。因此，可通过栽培措施对药用植物产量和品质进行调控。另外，对于植物次生代谢与光照强度间的关系，之前的研究已经进行了一些报道。碳素/营养平衡假说认为在养分充足的条件下，遮荫使光合作用受到抑制，植物体内的C/N下降，从而以C为基础的酚类(包括黄酮类化合物)、萜烯类物质减少[8]。
许多研究还发现收获季节对药用植物的化学成分和产量具有重要影响。Fang等[9]发现青钱柳中黄酮类化合物的积累高峰为7月和10月。多年生饲料作物苜蓿中的三萜类物质的含量同样受到收割季节的明显影响，从而影响其可饲性[10]。综上所述，非生物环境和发育阶段等因子都会对植物的生长和次生代谢物合成和积累产生影响。青钱柳作为一个木本药用树种，收获的主要部位为叶片。在生产实践中，我们关心的不仅是目标次生代谢产物在植物组织中的含量，还需要知道在一个特定环境条件中植物的生长状况。因此，通过评价光照条件和采收季节对青钱柳生长和主要次生代谢产物积累的影响，可以加深环境条件与青钱柳次生代谢关系的认识，还可以为确定药用青钱柳最佳栽培条件及采样期提供理论依据，以改善原料品质。
1. 研究地概况与研究方法
1.1 试验地概况
试验地位于江苏镇江扬子江苗圃基地，其地理坐标为32°16′40″ N、119°32′52″ E。该地属北亚热带湿润季风区，雨热同季，光照和热量充足。年均温度为14.1 ℃，年降水量为1 000~1 100 mm，且主要集中在6—9月，占全年降雨量的60%左右，无霜期为220 d；土壤类型为砂壤土，有机质含量为1.77%，水解氮、有效磷、速效钾含量分别为77、14.9、132.6 mg/kg[9]。
1.2 植物材料与试验设计
2009年10月从天然林中收集不同地理种源的青钱柳种子，并将从四川沐川(28°58′ N，103°47′ E)单株采种的种子作为本次试验的试材。这些种子经自然风干、脱种翅等处理后，首先进行酸蚀，然后分别用赤霉素(GA3)浸泡、低温层积以打破其休眠[11]。层积大约3个月后，将萌芽的幼苗移栽到塑料杯中。待幼苗高约6 cm时再次移栽到位于镇江苗圃的苗床上，株行距为40 cm×40 cm。
2010年6月将苗床上的青钱柳苗移栽到试验地中，株行距为40 cm×50 cm。次年3月将所有植株地上3 cm以上的部分进行截杆，以进行矮化管理。当年4月开始进行遮荫处理，试验包括：1)全光(CK)；2)遮阳网遮1层(L1)；3)遮阳网遮2层(L2)。试验重复3次，共9个试验单元，每个试验单元20株青钱柳苗。遮阳网为黑色的聚乙烯材料，放置于地面之上约2 m的位置。试验期间，每个试验处理的光照强度用农业气象监测仪(TNHY系列，浙江托普仪器公司)进行实时监测，同时记录空气的温度和湿度。光量子通量密度每30 min采集1次，而空气温湿度每10 min采集1次数据。除遮荫处理和每月1次的人工除草外，未对青钱柳苗进行额外水肥管理。
1.3 研究方法
1.3.1 苗高和地径生长测定
按常规方法于5月中旬开始对各试验单元中所有青钱柳植株的苗高和地径生长进行测定，最后计算各试验单元的平均树高和地径生长状况。以后每月中旬进行重复调查，直至生长基本停止的11月中旬。
1.3.2 植物样品的采集与处理
每月测定生长指标后，按照混合采样法从试验单元中的青钱柳植株中上部采集完全功能叶。6月中旬第1次采集，直至11月，共进行6次采样。采集的样品经去叶柄、烘干、磨碎后密封后保存在0~4 ℃冷库。
1.3.3 黄酮类化合物的提取及含量测定
每个植物样品称取约2 g左右，用滤纸包好后放入250 mL索氏提取器并用石油醚在80 ℃水浴锅中回流提取4 h，以去除叶样品中极性较小的脂溶性成分。丢弃提取液将药渣在室温下自然晾干，挥干后的药渣作为黄酮和三萜提取的样品。本试验采用超声波辅助提取法[12]。用75%乙醇水溶液在65 ℃条件下超声提取45 min，在同样条件下提取2次，并将两次提取液合并。合并后的提取液挥至近干，再以甲醇反复清洗残渣并定容至10 mL作为总黄酮和总三萜测定的样品。
总黄酮的测定参照Bao等[13]所描述的优化后的比色法进行测定。精密吸取1 mL提取液置于10 mL容量瓶，加入0.3 mL 5% NaNO2溶液，在室温下放置5 min后加入0.3 mL 1%的AlCl3甲醇溶液，而后加入1 m NaOH溶液混匀并在室温下显色15 min，最后在410 nm处测定吸光度。提取液中总黄酮含量以芦丁标准品(中国药品生物制品检定所，北京)为对照品进行计算(线性范围为：2.2~56.0 μg/mL，R2>0.99)，最后以每克青钱柳叶干样品中含有相当于芦丁当量的毫克数表示。
黄酮单体采用HPLC-DAD法测定，共测定3个单体:槲皮素、异槲皮苷和山奈酚。在进入高效液相分析前，所有待测样品过0.45 μm有机滤膜。本试验采用Agilent 1200系列液相色谱(Waldbronn，德国)进行分析，其中异槲皮苷采用梯度洗脱，洗脱程序为(A-色谱纯甲醇，B-0.5%磷酸)：0~25 min，15% A；15~26 min，15%~90% A；26~36 min，90% A；36~37 min，90%~15% A；37~45 min，15% A。检测波长为350 nm，柱温和流动相流速分别为30 ℃，1.0 mL/min。而槲皮素和山奈酚则参照《中华人民共和国药典》(2010)有关银杏黄酮水解的方法，将提取液用酸水解为苷元后测定。取1 mL提取液于广口瓶中，挥干溶剂，残渣中加入25 mL体积比为4:1的甲醇-25% HCL，加热回流30 min，冷却后定容至25 mL。槲皮素和山奈酚检测的流动相为A-色谱纯甲醇，B-0.3%磷酸，采用VA:VB=55:45等度洗脱。检测波长为365 nm，柱温和流动相流速与异槲皮苷检测条件相同。试验中用于获得外标校准曲线的异槲皮苷购自中国药品生物制品检定所(北京)，槲皮素和山奈酚购自Sigma-Aldrich公司(St. Louis，MO，USA)。
1.3.4 三萜类化合物的提取及含量测定
参照Fan等[14]，采用比色法测定青钱柳叶中的总三萜含量。精密吸取0.5 mL提取液，于60 ℃水浴中挥干溶剂，分别加入0.5 mL 5%香草醛-冰醋酸和1.4 mL高氯酸，置70 ℃水浴中显色15 min，冷却后转移至10 mL容量瓶，用乙酸乙酯反复清洗并定容，摇匀后在560 nm处测定吸光度。样品中总三萜含量以齐墩果酸(中国药品生物制品检定所，北京)标准品为对照品进行计算(线性范围为：3.8~24.6 μg/mL，R2>0.99)，最后以每克青钱柳叶干样品中含有相当于齐墩果酸当量的毫克数表示。
本试验选择测定的三萜单体包括青钱柳酸B、青钱柳甙Ⅰ和阿江榄仁酸。以Waters 2695 Alliance (Waters Crop. Milford，American)高效液相系统测定它们的含量。青钱柳酸B用UVD 2996二极管阵列检测器检测，检测波长为210 nm，流动相为A-色谱纯甲醇，B-0.5%磷酸。梯度洗脱程序为：0~16 min，20%~70% A；16~20 min，70%~90% A；20~32 min，90% A；32~37 min，90%~20% A；37~47 min，20% A。而青钱柳甙Ⅰ和阿江榄仁酸的定量用2424 ELSD检测，流动相为A-色谱纯甲醇，B-0.3%冰乙酸。梯度洗脱程序为：0~20 min，20%~90% A；20~35 min，90%~90% A；35~37 min，90%~20% A；37~45 min，20%~20% A。漂移管的温度为60 ℃，氮气流速为2.4 L/min。试验中用于获得外标校准曲线的青钱柳酸B和青钱柳甙Ⅰ由南京中医药研究所张建教授实验室提供，阿江榄仁酸购自云南西力生物制药有限公司(昆明)。
1.4 数据分析
本试验以双因素方差分析结果来比较遮荫、季节以及二者的交互作用对青钱柳生长和代谢等相关数量指标的影响；以Duncan’s多重比较来分析处理之间的差异。次生代谢产物含量与青钱柳生长速率间的关系及整个生长期内次生代谢产物含量与环境因子间的关系采用Pearson相关系数分析法。所有统计数据均由SPSS进行分析(version 16.0，SPSS Inc. Chicago，IL，USA)，分析结果表示在95%的置信水平上的显著水平。
2. 结果与分析
2.1 不同季节遮荫对主要环境因子的影响
遮荫处理使微气候环境受到影响，其中主要包括光照强度、空气温度和相对湿度等。试验期间(6—11月)实时记录了上述环境因子每天的变化情况，然后分别统计每日白天(06:00—18:00)的平均值，最后计算出每月白天的平均值(表 1)。
表 1 试验期间(6—11月)3个不同遮荫水平白天(06:00—18:00)主要环境因子的月平均值Table 1. Monthly mean values of mainly environmental factors under three shading treatments during the experimental period (from June to November) at the daytime (from 06:00 to 18:00)环境因子
Environmental factor处理
Treatment6月
June7月
July8月
August9月
September10月
October11月
November月均光照强度Monthly PPFD/(μmol·m-2·s-1) CK 403 418.1 518.9 391.1 373.6 273.3 L1 96.1 113.3 149.6 115.7 113.3 81.7 L2 40.6 43.6 60.1 47.5 45.0 41.7 月均空气温度Monthly mean air temperature/℃ CK 30.0 31.1 34.8 31.3 24.1 19.5 L1 26.6 28.6 32.3 28.4 22.9 18.5 L2 25.0 27.1 30.0 26.6 21.4 18.1 月均相对湿度Monthly mean RH/% CK 57.8 66.1 64.7 65.4 58.5 63.3 L1 59.3 76.4 71.6 73.9 65.3 68.1 L2 60.0 80.1 78.1 79.2 67.7 70.0 注：PPFD和RH分别表示光量子通量密度、相对湿度；CK、L1、L2分别表示全光、1层遮荫和2层遮荫。下同。Notes: PPFD and RH indicate photosynthetic photon flux density and relative humidity; CK, L1, L2 indicate no shading, one-layer shading and two-layer shading, respectively. The same below. 随着遮荫程度的加深，光照强度急剧下降，整个试验期间(6—11月)，全光、1层和2层遮荫条件下白天的平均光照强度分别为396.3、111.6和46.4 μmol/(m2·s)。在全光条件下，8月白天的月平均光照强度最大(518.9 μmol/(m2·s))，其次是6月和7月，从9—11月光照强度呈直线下降趋势。其他遮荫处理下的光量子通量密度均呈现相似的月动态变化规律。试验期间，遮荫还直接影响了空气温度，白天的空气温度与光照强度在不同遮荫处理间以及不同月份间都呈相似的变化规律，全光、1层和2层遮荫下白天空气温度的总平均值分别为28.5、26.2、24.7 ℃。然而，白天空气相对湿度对遮荫处理的响应与光照强度和空气温度对遮荫处理的响应相反，试验期间全光、1层和2层遮荫下白天的空气相对湿度分别为62.6%、69.1%、72.5%。
2.2 不同季节遮荫对生长的影响
2011年3—11月青钱柳植株的苗高月生长动态见图 1a。不同遮荫水平下的青钱柳苗具有相似的生长节律，5—8月是青钱柳苗高的旺盛生长期，该期间的生长量占年总生长量的72%以上。其中，6—7月的苗高生长速率最快，其后依次为7—8月、5—6月、3—5月、8—9月、9—10月，10月中旬以后青钱柳的苗高生长基本停止。轻度遮荫促进了青钱柳苗的高生长，其年总生长量达241.2 cm，但两层遮荫下青钱柳苗的高生长受到抑制，年生长量仅为105.0 cm(图 1a)。地径与苗高具有相似的生长节律，但二者又存在一些差异(图 1b)。地径的旺盛生长期较苗高生长要长，5—9月青钱柳苗地径生长较高，占年生长量的80%以上。另外，随着遮荫程度的不断提高，地径年生长量不断下降。方差分析结果表明，遮荫、季节及二者的交互作用均对苗高和地径的年生长量产生了显著的影响(P＜0.001，表 2)。因此，光照条件的改变对青钱柳的生长和初级生产力都可能产生重要影响。
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图 1 遮荫对青钱柳苗高(a)和地径(b)的月净生长量、年总生长量的影响Figure 1. Effects of shading on monthly growth rate and annual increment of tree height (a) and basal diameter (b)表 2 遮荫、季节及2者的交互作用对青钱柳生长、黄酮和三萜积累的影响(P值)Table 2. Summary of significance levels (two-way ANOVA) for the effects of shading, sampling time and their interaction on growth and the contents of flavonoid and triterpenoid in leaves of Cyclocarya paliurus (P value)指标
Index变异来源 Variation source 遮荫Shading 季节Sampling time 交互作用Interaction 苗高Tree height ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 地径Basal diameter ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 总黄酮Total flavonoid ＜0.001 ＜0.001 0.215 槲皮素Quercetin ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 异槲皮苷Isoquercitrin ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 山奈酚Kaempferol ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 总三萜Total triterpenoid ＜0.001 ＜0.001 0.045 青钱柳酸B Cyclocaric acid B ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 青钱柳甙Ⅰ Cyclocarioside Ⅰ ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 阿江榄仁酸Arjunolic acid ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 2.3 不同季节遮荫对黄酮类化合物积累的影响
青钱柳叶中的黄酮含量(包括总黄酮和3个黄酮单体：槲皮素、异槲皮苷和山奈酚)受到遮荫、收获季节的明显影响(图 2)。其中，最主要的黄酮单体为异槲皮苷，其变异范围为0.07~4.19 mg/g，其次为山奈酚(0.06~3.24 mg/g)和槲皮素(0.04~1.51 mg/g)，而总黄酮在处理间的变异范围为19.5~53.0 mg/g。遮荫处理使青钱柳叶中的总黄酮及黄酮单体含量均显著下降，但1层遮荫和2层遮荫下，黄酮含量并无显著差异(图 2、表 2)。如10月份1层遮荫下青钱柳叶片中的总黄酮、槲皮素、异槲皮苷和山奈酚平均含量仅为全光下的59.7%、25.0%、20.6%和32.8%。由此可知，遮荫处理引起的环境条件的变化抑制了青钱柳叶中黄酮类化合物的积累。
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图 2 遮荫和采样季节对青钱柳黄酮类化合物积累的影响Figure 2. Effects of shading and sampling time on flavonoid accumulation in leaves of C. paliurus另外，青钱柳叶中的黄酮类化合物在不同季节也发生的显著的变异(图 2、表 2)。6—11月，总黄酮和黄酮单体的含量在全光下均呈现“双峰型”的变化模式。含量最高的月份为8月和10月，这两个月青钱柳叶中的黄酮含量较其他月份高。而在青钱柳旺盛生长的前期(6月和7月)及生长后期(11月)黄酮含量较低。8—10月的总黄酮、槲皮素、异槲皮苷和山奈酚的含量较其他月份平均高出31.7%、65.1%、74.3%和69.3%。然而遮荫处理使黄酮含量的季节变化动态发生了一定的变化。其中，槲皮素的含量在遮荫条件下从6—11月呈现直线增长模式(图 2b)。总黄酮的含量在1层遮荫下在9月达到峰值，随后开始下降(图 2a)。同样，异槲皮苷和山奈酚的含量在1层遮荫下在9月达到最高，而在两层遮荫下在10月达到最高，总体表现为“单峰型”变化模式(图 2a、2c、2d)。此外，我们还可以发现，随遮荫强度的加大，青钱柳叶中黄酮类物质积累的高峰发生推迟。总之，青钱柳叶中的黄酮类化合物的积累呈现明显的季节变异模式，而且遮荫可以改变黄酮类化合物的季节变异模式。
2.4 不同季节遮荫对三萜类化合物积累的影响
青钱柳叶中三萜类化合物的积累也受到遮荫、收获季节的显著影响(P＜0.001，表 2)。在检测的三萜单体中主要的三萜类化合物为阿江榄仁酸，其变异范围为0.00~5.99 mg/g，其后依次为青钱柳甙Ⅰ(0.35~3.67 mg/g)和青钱柳酸B(0.05~2.91 mg/g)(图 3)。总三萜在处理间的变异范围为13.2~40.7 mg/g dm。与黄酮类化合物相比，不同的三萜类物质对遮荫的响应并不一致。总黄酮和青钱柳甙Ⅰ的含量在全下高于遮荫条件下，但在6月、7月和11月与遮荫条件下的差异并不显著。另外两个三萜单体青钱柳酸B和阿江榄仁酸的含量对遮荫的响应则完全相反，在三萜积累的高峰期(7—11月)遮荫处理促进了它们在青钱柳叶中的积累，而重度遮荫下的含量又低于中度遮荫下。因此，黄酮与三萜及不同三萜类单体化合物对遮荫引起的环境变化的响应存在差异。
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图 3 遮荫和采样季节对青钱柳三萜类化合物积累的影响Figure 3. Effects of shading and sampling time on triterpenoid accumulation in leaves of C. paliurus总三萜和三萜单体含量的季节变化动态如图 3所示。在不同的遮荫水平下，三萜积累具有相似的季节变化动态，含量均在9月达到最大，呈现“单峰型”的变化模式。总三萜、青钱柳酸B、青钱柳甙Ⅰ和阿江榄仁酸在9月的平均含量与其他月份相比，分别高出56.9%、191.1%、166.5%和168.6%。另外，总三萜和青钱柳甙Ⅰ的含量在7月最低，其中青钱柳甙Ⅰ的含量在9月后迅速下降，而总三萜在该时期含量变化较小(图 3a、c)。但另外两个五环三萜青钱柳酸B和阿江榄仁酸在6月的含量极低，其中我们未在6月采集的青钱柳叶中发现阿江榄仁酸的积累(图 3b、d)。从6—9月，青钱柳酸B和阿江榄仁酸的含量呈直线上升，之后又迅速下降。综上所述，遮荫仅仅影响到三萜在青钱柳叶中的积累量，但并未影响到季节的变化动态。
2.5 青钱柳次生代谢物积累与生长速率间的关系分析
在得到不同遮荫水平下青钱柳的苗高和地径生长节律、黄酮和三萜类化合物季节变化动态的基础上，进一步分析青钱柳次生代谢物积累与生长间的关系，结果见表 3。其中，苗高和地径生长与青钱柳中黄酮类化合物的积累无明显关系，相关分析结果都不显著。而三萜类化合物与生长间均呈负相关，其中总三萜和阿江榄仁酸的积累与苗高生长间的相关性达到显著水平(P＜0.05)，分别为-0.497和-0.473(n=18)。另外，阿江榄仁酸的积累还与地径生长间呈显著负相关关系(P＜0.05)。因此，在青钱柳中的两类次生代谢产物中，三萜类化合物与生长间的关系更为紧密。
表 3 青钱柳叶黄酮和三萜含量与生长速率间的相关分析(n = 18)Table 3. Pearson correlation coefficients between the contents of leaf flavonoid and triterpenoid and growth rate (n=18)项目
Item苗高
Tree height地径
Basal diameter总黄酮Total flavonoid 0.011 0.31 槲皮素Quercetin 0.234 -0.168 异槲皮苷Isoquercitrin -0.15 0.418 山奈酚Kaempferol 0.074 0.451 总三萜Total triterpenoid -0.497* -0.223 青钱柳酸B Cyclocaric acid B -0.209 -0.179 青钱柳甙Ⅰ Cyclocarioside Ⅰ -0.227 0.174 阿江榄仁酸Arjunolic acid -0.473* -0.470* 注：*表示在0.05水平上显著相关(P＜0.05)。Note: * indicates correlation is significant at P＜0.05 level. 3. 讨论与结论
光照条件是影响植物生长发育、生理代谢、形态建成的重要环境因子。本试验中，中度遮荫促进的青钱柳的高生长，但遮荫抑制了地径生长。另外，遮荫也影响了青钱柳活性次生代谢产物的积累，从而影响叶片的品质或利用价值。之前已经有很多研究发现，黄酮类和萜类等植物次生代谢产物的合成和积累受光照、水分、土壤养分、发育时期等多种生物因子与非生物因子的广泛影响[15-18]。在本试验中，遮荫处理抑制了青钱柳叶中黄酮类化合物的积累(图 2)，这一结果与我们之前得到的结果一致[19]。Cronin等[20]也发现自然光下两种淡水植物体中的酚类物质的含量较遮荫条件下高72%。黄酮类物质在植物体内具有重要的生态功能，其中最重要的功能就是作为抗氧化物质，保护植物组织不受自由基的破坏，吸收太阳辐射中的紫外线等[21-24]，因此，它的含量与组成受到光强和紫外辐射的调节[22]。还有一些研究发现生长于自然光下的越桔(Vaccinium myrtillus)，编码苯丙氨酸解氨酶、查耳酮合酶以及黄烷酮-3-β-羟化酶的基因表达量增加，使其叶中的槲皮素和山奈酚含量上升[25]。另外，也有研究表明紫外照射使黄酮合成相关酶的基因表达量、蛋白质含量及酶活性上升，最终使黄酮的积累量增大[26-27]。这些研究都表明强光照对黄酮的合成与积累具有促进作用。碳素/营养平衡假说也认为，光照条件的限制将会使以碳为基础的植物次生代谢产物的含量减少，如黄酮类和三萜类[28]。相应的，目前的研究中也发现全光条件下青钱柳叶中积累了更多的黄酮，这也证明了他们在光保护机制中所发挥的作用。
萜类化合物是一类重要的次生代谢产物，在植物中它们常见于被子植物，在一些蕨类植物中也有发现[29]。但目前对其开展的研究较少，对它们的生态功能、生物合成途径以及环境因子对它们的调控机理都还不是十分清楚。据我们所知，目前还没有关于田间条件下环境因子对青钱柳中三萜类化合物积累影响的研究和报道。本试验中，遮荫处理也对青钱柳总三萜和三萜单体青钱柳酸B、阿江榄仁酸的含量产生了显著影响。Houle等[30]发现生长于树冠顶部的成熟阿比希尼亚柿(Diospyros abyssinica)果实中的三萜皂苷比下部低将近2倍，这些三萜皂苷(桦木醇和桦木脂酸)具有潜在的毒性，因而影响到果实的品质。Fournier等[31]也发现生长于较低光照强度(光量子通量密度不大于自然光下的35%)下的西洋参，通过延长光照时间可以使一年生和两年生西洋参中的人参皂苷含量分别提高48%和62%。如果使光照强度增大，不仅使光合作用受到抑制，还使西洋参中的人参皂苷的合成和积累量减少。这也进一步证实了三萜皂苷的合成和积累与植物本身的光合代谢密切相关。此外，本试验中，除总三萜和青钱柳甙Ⅰ的积累受到遮荫抑制外，另外两个三萜单体青钱柳酸B和阿江榄仁酸的含量均在自然光下最低(图 3)。Shimoyamada等[32]也发现，在发芽的大豆(Glycine max)种子中，处于白天-黑夜交替过程种子中的萜类化合物含量较完全黑暗中的高，但不同萜类化合物响应模式并不一致，这一结果与我们目前的结论基本一致。这也表明，不同类型的萜类物质的合成和积累对光照条件的响应存在差异。本试验所测试的三萜单体中，青钱柳酸B和阿江榄仁酸为齐墩果烷型五环三萜，而青钱柳甙Ⅰ为达玛烷型四环三萜。这两类三萜物质拥有共同的合成前体物质2, 3-氧鲨烯，但有不同的合成路径[33]。但环境因子对不同三萜化合物合成影响的机制还需要进一步研究。
收获季节也是影响活性次生代谢物积累及青钱柳叶片质量的重要影响因子。在之前的研究中，Fang等[9]发现从6月至10月，青钱柳黄酮在7月和10月的含量明显高于其他月份，呈现双峰变化的时间模式，这与我们目前所得到的结果基本一致。但本试验中，从6至11月，在全光条件下8月和10月是黄酮积累的高峰期。在18年生核桃叶(Juglans regia)中，Amaral等[34]发现黄酮和酚酸的含量在5月最高，而且从5—9月呈直线下降趋势。但在遮荫条件下，青钱柳叶黄酮积累的变化模式与全光下相比发生了巨大变化，总体上黄酮积累的高峰期在不同程度上发生推迟。据我们所知，目前没有进行相关遮荫与采样时间的交互作用对黄酮积累影响的研究。在生长期内，随着收获时间的推迟，也伴随着植物叶片的生理老化，这将使植物组织中的自由基水平提高[35]。作为一种植物保护性物质或抗氧化剂，黄酮含量的增加可以更好的保护植物组织不被自由基所损伤[18, 36]。Schmidt等[17]发现从10月到次年1月，随着收获季节的推迟，甘蓝叶中的槲皮素及槲皮素山奈酚含量比都增大了。另外，Camargo等[37]认为光照是影响植物物候发展的关键环境因子。本试验中，黄酮单体积累高峰的推迟，可能意味着遮荫处理推迟了青钱柳叶片的生理老化速度。
三萜含量随采样时间的推移也发生了明显的变异。遮荫水平除对三萜的含量产生影响外，并未对三萜积累的季节动态产生影响。Alqahtani等[38]发现澳大利亚积雪草中的总三萜含量在夏季更高，而在冬季较低，这与我们目前的结果基本一致。Tava等[39]也指出收获季节和生理状况是影响紫花苜蓿(Medicago sativa)中三萜皂苷含量主要因子。通过监测生长期苜蓿中两种含量最多的三萜皂苷(medicagenic acid, zanhic acid)的含量，他发现medicagenic acid的含量从春季至夏季直线上升，然后从夏季到秋季又开始下降。而zanhic acid的含量从春季至秋季一直上升，并在夏末和秋季达到最高。在另外一个研究中，也发现苜蓿中三萜皂苷的含量在初春和夏季中期最低[40]。这些研究都是针对三萜在饲料作物中积累的变化从而提出合理的采收季节，避免过高含量的三萜皂苷可能对动物造成的毒害。最近，还有一些针对以三萜皂苷为主要活性成分的药用植物的研究，以确定采收期、提高药材质量[41-42]。总之，光照条件、发育时期都会影响黄酮类和三萜类物质的积累。因此，在青钱柳人工林培育过程中，系统研究立地条件、培育措施和采样季节对青钱柳生长或单位面积上青钱柳叶产量、重要次生代谢物积累的影响，从而为药用青钱柳筛选出优化的定向培育模式至关重要。
植物的初级代谢与次生代谢紧密相连，初生代谢为次生代谢提供了原料[43]。最佳防御假说认为植物次生代谢产物的产生是以减少植物生长的机会成本为代价的[44-45]。目前，已经有多个假说被提出用以解释植物的生长与次生代谢间的这种取舍平衡的关系[8]。本试验中，总三萜和阿江榄仁酸与生长间呈显著负相关，其他三萜单体与生长则无显著相关性(表 3)。之前有研究也指出由于不同树种间生长节律的差异，而可能导致得到正的或负的生长与次生代谢物积累的相关关系[46]。另外，在整个较长的年生长期内，植物次生代谢产物的积累同时受到环境因子(包括生物与非生物)和自身生理状况的影响，环境条件与发育时期的交互作用可能使某些植物次生代谢的积累难以被预测。但本试验结果表明，青钱柳的生长与次生代谢物积累间关系较弱。关于植物次生代谢与初级代谢间的关系，有待于从植物生理生化及基因表达等方面进行深入研究。
综上所述，遮荫处理显著影响了环境中的光照强度、空气温度和相对湿度，并进一步影响了青钱柳的苗高和地径生长、黄酮类和三萜类化合物的积累，但不同次生代谢物对光照的响应存在差异。另外，从6—11月，遮荫不仅降低了黄酮类化合物的积累量，还推迟了其积累高峰期，但三萜类物质积累的季节变异模式未受遮荫影响。而关于不同三萜单体对光照的响应，以及次生代谢与初级代谢间的关系还需进行深入研究。
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图 1 试验小区布设图
CK.对照组；Y.叶面肥；C.冲施肥。数字表示肥料用量，单位为mL/m2。
Figure 1. Layout of experimental plots
CK, control; Y, foliar fertilizer; C, flush fertilizer. The numbers represent the amount of fertilizer, the unit is mL/m2.
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图 2 2016年7—8月降雨量与土壤蒸发量
Figure 2. Rainfall and soil evaporation during July to August in 2016
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图 3 冲施肥对沙木蓼土壤含水率的影响
不同字母表示处理间差异显著(P＜0.05)。下同。
Figure 3. Effects of flush fertilizer on the soil water content of Atraphaxis bracteata
Different letters indicate significant difference among treatments at P < 0.05 level. The same below.
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图 4 叶面肥对沙木蓼土壤含水率的影响
Figure 4. Effects of foliar fertilizer on soil water content of Atraphaxis bracteata
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图 7 施肥对沙木蓼地径增长量的影响
Figure 7. Effects of fertilization on the growth of ground diameter of Atraphaxis bracteata
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图 8 施肥对沙木蓼株高增长量的影响
Figure 8. Effects of fertilization on the tree height increment of Atraphaxis bracteata
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图 9 施肥对沙木蓼新梢生长的影响
Figure 9. Effects of fertilization on the growth of Atraphaxis bracteata new shoots
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9 施肥对沙木蓼群落物种多样性的影响
不同字母表示处理间差异显著(P＜0.05)。
9. Effects of fertilization on the species diversity of Atraphaxis bracteata
Different letters indicate significant difference among treatments at P < 0.05 level.
表 1 沙木蓼地径与株高的原始值分析
Table 1 Analysis on original values of ground diameter and tree height of Atraphaxis bracteata
cm 施肥处理
Fertilization treatment植物指标
Plant index肥料用量Fertilizing amount 0 3 mL/m2 6 mL/m2 9 mL/m2 12 mL/m2 15 mL/m2 冲施肥Flush fertilizer 地径Ground diameter 0.50a 0.49a 0.53a 0.54a 0.57a 0.53a 株高Plant height 104.87a 103.87a 119.67a 104.93a 106.40a 104.93a 叶面肥Foliar fertilizer 地径Ground diameter 0.50a 0.53a 0.49a 0.54a 0.56a 0.55a 株高Plant height 104.87a 103.33a 100.33a 108.73a 108.60a 104.67a 注：不同小写字母表示不同处理之间差异显著(P>0.05)。Note: different lowercases mean significant difference among varied treatments at P>0.05 level. 
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表 2 鲜海带生物酶解有机液肥主要成分
Table 2 Main ingredients of fresh seaweed bio-enzymatic liquid organic fertilizer
液肥
Liquid fertilizer主要成分
Main component叶面肥
Foliar fertilizer海带酶解液、海藻多糖、海藻蛋白、甘露醇、甜菜碱、赤霉素、吲哚乙酸、脱落酸、氨基酸等Kelp hydrolysate, seaweed polysaccharide, seaweed protein, mannitol, betaine, gibberellin, indoleacetic acid, abscisic acid, amino acid, etc 冲施肥
Flush fertilizer海带纤维、有机质、海藻多糖、吲哚乙酸、海藻蛋白、甘露醇、甜菜碱等Kelp fiber, organic matter, seaweed polysaccharide, indoleacetic acid, seaweed protein, mannitol, betaine, etc
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表 3 小区施肥用量
Table 3 Fertilizing amount in 3 plots
肥料用量
Fertilizing amount/(mL·m-2)小区肥料用量
Community fertilizing amount/mL小区用水量
Community water consumption/mL小区补水量
Community water recharge/mL0 0 27 000 0 3 27 5 400 21 600 6 54 10 800 16 200 9 81 16 200 10 800 12 108 21 600 5 400 15 135 27 000 0
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表 4 不同梯度冲施肥处理的物种相对丰度
Table 4 Relative abundance of species in different gradient treatments of flush fertilizer
物种名称Species name CK 3 mL/m2 6 mL/m2 9 mL/m2 12 mL/m2 15 mL/m2 杨柴Hedysarum fruticosum 44.84 23.88 22.09 19.06 16.08 14.53 白蒿Artimisiae sphaerocephala 25.82 21.70 0 6.36 22.99 39.40 油蒿Artemisia ordosica 20.92 9.20 0 10.00 0 0 冰草Agropyron cristatum 8.42 0 22.42 24.57 0 9.53 芦苇Phragmites australis 0 14.48 6.30 0 0 12.15 狗尾草Setaria viridis 0 17.70 19.76 18.66 15.54 12.37 砂蓝刺头Echinops gmelini 0 13.49 0 0 0 6.36 沙蓬Agriophyllum squarrosum 0 14.56 5.39 0 0 0 角蒿Incarvillea sinensis 0 0 0 0 4.53 0
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表 5 不同梯度叶面肥处理的物种相对丰度
Table 5 Relative abundance of species in different gradient treatments of foliar fertilizer
物种名称Species name CK 2 mL/m2 4 mL/m2 6 mL/m2 8 mL/m2 10 mL/m2 杨柴Hedysarum fruticosum 58.33 29.67 15.06 18.62 13.47 12.75 白蒿Artimisiae sphaerocephala 0 34.71 7.10 31.36 27.99 19.52 油蒿Artemisia ordosica 41.67 6.56 8.87 23.11 11.92 17.27 冰草Agropyron cristatum 0 24.56 21.89 21.07 22.57 16.53 芦苇Phragmites australias 0 0 12.32 0 6.57 12.52 狗尾草Setaria viridis 0 9.56 11.42 14.18 15.94 7.28 针茅Stipa capillata 0 0 10.59 0 0 6.40 花棒Hedysarum scoparium 0 0 0 10.61 0 0
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[1] 孙保平.荒漠化防治工程学[M].北京:中国林业出版社, 2000:1. Sun B P. Desertification engineering [M]. Beijing: China Forestry Publishing House, 2000:1.
[2] 韩东锋, 孙德祥, 周广阔, 等.半荒漠风沙区5种优良沙生灌木造林效果比较[J].西北农业学报, 2009, 18(5): 312-315. doi: 10.3969/j.issn.1004-1389.2009.05.068 Han D F, Sun D X, Zhou G K, et al. Comparison among the afforest effects of 5 excellent desert shrubs in semi-desert area [J]. Acta Agriculturae Boreali-Occidentalis Sinica, 2009, 18 (5):312-315. doi: 10.3969/j.issn.1004-1389.2009.05.068
[3] 赵岩, 周文渊, 孙保平, 等.毛乌素沙地三种荒漠灌木根系分布特征与土壤水分研究[J].水土保持研究, 2010, 17(4):129-133. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=stbcyj201004028 Zhao Y, Zhou W Y, Sun B P, et al. Root distribution of three desert shrubs and soil moisture in Mu Us Sand Land[J]. Research of Soil and Water Conservation, 2010, 17(4):129-133. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=stbcyj201004028
[4] Harpole W S, Potts D L, Suding K N. Ecosystem responses to water and nitrogen amendment in a California grassland[J]. Global Change Biology, 2007, 13(11): 2341-2348. doi: 10.1111/gcb.2007.13.issue-11
[5] 周国英, 陈桂琛, 赵以莲, 等.施肥和围栏封育对青海湖地区高寒草原影响的比较研究Ⅱ地上生物量季节动态[J].草业科学, 2005, 22(1): 59-63. doi: 10.3969/j.issn.1001-0629.2005.01.019 Zhou G Y, Chen G C, Zhao Y L, et al. Comparative studies on influence of chemical fertilizer application and enclosure on alpine steppes in Qinghai Lake (Ⅱ): seasonal and annual biomass dynamics[J]. Pratacultural Science, 2005, 22(1): 59-63. doi: 10.3969/j.issn.1001-0629.2005.01.019
[6] 王大明.试论高寒人工草地施氮的增产效应[J].中国草地, 1994, 16(2): 76-80. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=QK199400569880 Wang D M. A discussion on incremental response of to alpine sown pasture N application[J]. Grassland of China, 1994, 16(2): 76-80. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=QK199400569880
[7] 孙斌.三种改良措施对高寒退化草地植被的影响[J].甘肃农业大学报, 2005, 40(6): 797-801. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=gsnydxxb200506017 Sun B. Three grassland improvement measures on alpine degraded grassland vegetation[J]. Journal of Gansu Agricultural University, 2005, 40(6): 797-801. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=gsnydxxb200506017
[8] 纪亚君.青海高寒天然草地施氮肥试验[J].中国草地, 2005, 27(6): 69-71. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgcd200506014 Ji Y J. Effects of nitrogen on grass yield in Qinghai alpine meadow[J]. Grassland of China, 2005, 27(6): 69-71. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgcd200506014
[9] 仁青吉, 罗燕江, 王海洋, 等.青藏高原典型高寒草甸退化草地的恢复:施肥刈割对草地质量的影响[J].草业学报, 2004, 13(2):43-49. doi: 10.3321/j.issn:1004-5759.2004.02.007 Ren Q J, Luo Y J, Wang H Y, et al. Restoration of degraded typical meadowland on the Qinghai-Tibetan Plateau: effect of fertilizing and cutting on grassland quality[J]. Acta Prataculturae Sinica, 2004, 13(2):43-49. doi: 10.3321/j.issn:1004-5759.2004.02.007
[10] 李燕婷, 肖艳, 李秀英, 等.作物叶面施肥技术与应用[M].北京:科学出版社, 2009:11. Li Y T, Xiao Y, Li X Y, et al. The foliar fertilization technology and application[M]. Beijing: Science Press, 2009:11.
[11] 王周琼, 李述刚, 程心俊.有机无机复合与荒漠化防治[M].北京:科学出版社, 2003:92-212. Wang Z Q, Li S G, Cheng X J. Organic inorganic compound and prevention of desertification [M]. Beijing: Science Press, 2003:92-212.
[12] 马红梅, 王锁民, 张建全, 等.专用有机肥对荒漠植物梭梭的生长及耐旱性的影响[J].草业科学, 2016, 33(2):240-248. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=caoyekx201602009 Ma H M, Wang S M, Zhang J Q, et al. The special organic fertilizer in improving the growth and drought tolerance of desert plant Haloxylon ammodendron[J]. Pratacultural Science, 2016, 33(2):240-248. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=caoyekx201602009
[13] Goldberg D E, Miller T E. Effects of different resource additions of species diversity in an annual plant community [J]. Ecology, 1990, 71(1): 213-225. doi: 10.2307/1940261
[14] 汪金松, 赵秀海, 张春雨, 等.模拟氮沉降对油松林土壤有机碳和全氮的影响[J].北京林业大学学报, 2016, 38(10): 88-94. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/bjlydxxb201610011 Wang J S, Zhao X H, Zhang C Y, et al. Effects of simulated nitrogen deposition on soil organic carbon and total nitrogen content in plantation and natural forests of Pinus tabuliformis[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2016, 38(10):88-94. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/bjlydxxb201610011
[15] Xu W W, Liu H Y, Tan X S, et al. Effects of seaweed bio-organic fertilizer on growth and yield of winter wheat[J]. Agricultural Science & Technology, 2016, 17(11):2555-2559. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=hnnykjtx-e201611027
[16] Liu P J, Wang F, Zhang S Q. Effect of seaweed bio-organic fertilizer on seed germination and seedling growth of vegetables[J]. Agricultural Science & Technology, 2014, 15(3):407-411.
[17] 张军红.毛乌素沙地油蒿群落土壤水分分布与动态[D].北京: 中国林业科学研究院, 2013. Zhang J H. Distribution and dynamics of soil moisture in Artemisia ordosica communities in Mu Us Sandy Land [D]. Beijing: Chinese Academy of Forestry, 2013.
[18] 李博.生态学[M].北京:高等教育出版社, 2004:118-119. Li B. Ecology [M]. Beijing: Higher Education Press, 2004:118-119.
[19] 王莉, 秦树高, 张宇清, 等.生物土壤结皮对毛乌素沙地油蒿群落土壤水分的影响[J].北京林业大学学报, 2017, 39(3):48-56. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160383 Wang L, Qin S G, Zhang Y Q, et al. Influence of biological soil crusts on soil moisture in Artemisia ordosica community in Mu Us Desert, northwestern China[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2017, 39(3):48-56. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160383
[20] 穆家伟, 查天山, 贾昕, 等.毛乌素沙地典型沙生灌木对土壤蒸发的影响[J].北京林业大学学报, 2016, 38(12): 39-45. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160192 Mu J W, Zha T S, Jia X, et al. Influence of typical sandy shrubs on soil evaporation in Mu Us Sandland, northwestern China[J].Journal of Beijing Forestry University, 2016, 38(12):39-45. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160192
[21] 王改兰, 段建南, 贾宁凤, 等.长期施肥对黄土丘陵区土壤理化性质的影响[J].水土保持学报, 2006, 20(4): 82-85, 89. doi: 10.3321/j.issn:1009-2242.2006.04.019 Wang G L, Duan J N, Jia N F, et al. Effects of long-term fertilization on soil physical and chemical property in loess hilly area[J]. Journal of Soil and Water Conservation, 2006, 20(4):82-85, 89. doi: 10.3321/j.issn:1009-2242.2006.04.019
[22] 苏洁琼, 李新荣, 鲍婧婷.施氮对荒漠化草原土壤理化性质及酶活性的影响[J].应用生态学报, 2014, 25(3): 664-670. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=yystxb201403006 Su J Q, Li X R, Bao J T. Effects of nitrogen addition on soil physico-chemical properties and enzyme activities in desertified steppe[J]. Chinese Journal of Applied Ecology, 2014, 25(3):664-670. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=yystxb201403006
[23] 胡静.绿色纤维的应用及发展[J].科技创新导报, 2013 (11):66. doi: 10.3969/j.issn.1674-098X.2013.11.053 Hu J. The application and development of green fiber[J]. Science and Technology Innovation Herald, 2013(11):66. doi: 10.3969/j.issn.1674-098X.2013.11.053
[24] Vourlitis G L, Pasquini S, Zorba G. Plant and soil N response of southern Californian semi-arid shrub lands after 1 year of experimental N deposition[J].Ecosystems, 2007, 10:263-279. doi: 10.1007/s10021-007-9030-2
[25] 涂利华, 胡庭兴, 张健, 等.华西雨屏区苦竹林土壤酶活性对模拟氮沉降的响应[J].应用生态学报, 2009, 20(12): 2943-2948. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=yystxb200912015 Tu L H, Hu T X, Zhang J, et al. Soil enzyme activities in a Pleioblastus amurus plantation in rainy area of west China under simulated nitrogen deposition [J]. Chinese Journal of Applied Ecology, 2009, 20(12):2943-2948. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=yystxb200912015
[26] Patterson T B, Guy R D, Dang Q L.W. Hole-plant nitrogen and water-relations trais, and their associated tradeoffs, in adjacent muskeg and upland boreal spruce species[J]. Oecologia, 1997, 110(2):160-168. doi: 10.1007/s004420050145
[27] 刘彤, 王琛, 徐璐, 等.叶面施氮对东北红豆杉幼苗生长及光合特性的影响[J].北京林业大学学报, 2016, 38(8): 64-70. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160099 Liu T, Wang C, Xu L, et al. Effects of foliar nitrogen application on growth and photosynthetic characteristics of Taxus cuspidata seedings[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2016, 38(8):64-70. doi: 10.13332/j.1000-1522.20160099
[28] 李宜伟, 蒋进, 宋春武, 等.发酵肥料对沙地水分与植物生长的影响[J].干旱区资源与环境, 2012, 26(2): 161-166. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=ghqzyyhj201202028 Li Y W, Jiang J, Song C W, et al. Effects of fermented manure on sandy land soil moisture and growth of plants[J]. Journal of Arid Land Resources and Environment, 2012, 26(2):161-166. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=ghqzyyhj201202028
[29] 陈亚明, 李自珍, 杜国祯.施肥对高寒草甸植物多样性和经济类群的影响[J].西北植物学报, 2004, 24(3): 424-429. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=xbzwxb200403009 Chen Y M, Li Z Z, Du G Z. Effects of fertilization on plant diversity and economic herbage groups in alpine meadow [J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2012, 24(3):424-429. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=xbzwxb200403009
[30] 郑华平, 陈子萱, 王生荣, 等.施肥对玛曲高寒沙化草地植物多样性和生产力的影响[J].草业学报, 2007, 16(5): 34-39. doi: 10.3321/j.issn:1004-5759.2007.05.004 Zheng H P, Chen Z X, Wang S R, et al. Effects of fertilizer on plant diversity and productivity of desertified alpine grassland at Maqu, Gansu [J]. Acta Prataculturae Sinica, 2007, 16(5):34-39. doi: 10.3321/j.issn:1004-5759.2007.05.004
[31] 王堃, 吕进英, 邵新庆.沙漠化草地的恢复与重建途径[J].草地学报, 2004, 12(3):240-245. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/cdxb200403016 Wang K, Lü J Y, Shao X Q. Measures of restoring and rebuilding desertified grassland[J]. Acta Agrestia Sinica, 2004, 12(3):240-245. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/cdxb200403016
[32] 王长庭, 龙瑞军, 王启基, 等.不同类型高寒草地群落物种特征和均匀度的重要性[J].草地学报, 2005, 13(4): 320-323. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=cdxb200504013 Wang C T, Long R J, Wang Q J, et al. Importance of species characteristics and evenness in different type grassland[J]. Acta Agrestia Sinica, 2005, 13(4):320-323. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=cdxb200504013
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期刊类型引用(6)
1. 姜有军. 探究沙木蓼的引种与栽培技术. 农业灾害研究. 2023(03): 40-42 . 
百度学术
2. 亓守贺，李昊远，张恒，孔凡克，曲威. 复合酶解耦合微生物发酵制备海藻生物有机液肥的研究. 湖北农业科学. 2022(07): 20-24+30 . 百度学术
3. 王冠都，王俊，王慧荣，李胜利，张世柏，孙清华，汪强. 有机种植下液肥施用量对番茄生长及品质的影响. 河南科学. 2022(07): 1062-1070 . 百度学术
4. 李思，弓瑶，詹保成，李友丽，王利春，郭文忠. 中国有机液肥的应用现状及发展趋势. 中国农学通报. 2021(21): 75-79 . 百度学术
5. 刘晓佩，李鸣晓，戴昕，李雪琪，窦润琪，王勇，贾璇，冯作山，安立超. 不同菌剂制备餐厨垃圾液态有机肥过程物质转化规律研究. 环境工程技术学报. 2021(04): 750-755 . 百度学术
6. 张世婷. 浅谈沙木蓼的引种与栽培. 中国林业产业. 2021(08): 49-50 . 百度学术
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