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赵铁珍, 汪杭军1, 韦艳葵, 段文霞, 刘剑锋, 刘鹏举, 王兰珍, 周传艳, 李国雷, 耿玉清, 薛康, 任强, 方升佐, 张冬梅, 王立海, HUALi_zhong, 李生宇, 党文杰, 朱小龙, 李雪华, 吴丽娟, 王旭, 李义良, 周亮, 李振基, 雷加强, 高岚, 余新晓, 刘勇, 刘勇, 黎明, 方陆明, 李建章, 韩士杰, 苏晓华, 尹光彩, JIANGXi_dian, 杨娅, 阎秀峰, 朱波, 周宇飞, 宋永明, 何茜, 崔同林, 周国逸, 杨慧敏, 周国逸, 柯水发, 赖志华, 徐新文, 王新杰, HEXiu_bin, 刘锐, 徐扬, 鹿振友, 王春林, 王清文, 唐小明, 虞木奎, 沈熙环, 孙向阳, 玲, 喻理飞, 张冰玉, 宗文君, 程云清, 李吉跃, 李晓兰, 陈实, 孙阁, 齐涛, 张志毅, 王伟宏, , 郭蓓, 国庆, 李丙文, 宋爱琴, 陈峻崎, 3, 茹广欣, 温亚利, 李俊清, 周晓梅, 陈培金, 王建林, 刘志明, 周玉平, 王晓静, 长山, 王旭, 姚永刚, 张可栋, 蒋德明, 唐旭利, 陈放, 王春林, 关少华, 宋湛谦, 赵双荣, 杨伟伟, 闫俊华, 郑凌峰. 油松SSR-PCR引物筛选及反应体系的建立[J]. 北京林业大学学报, 2007, 29(2): 13-17.
引用本文: 赵铁珍, 汪杭军1, 韦艳葵, 段文霞, 刘剑锋, 刘鹏举, 王兰珍, 周传艳, 李国雷, 耿玉清, 薛康, 任强, 方升佐, 张冬梅, 王立海, HUALi_zhong, 李生宇, 党文杰, 朱小龙, 李雪华, 吴丽娟, 王旭, 李义良, 周亮, 李振基, 雷加强, 高岚, 余新晓, 刘勇, 刘勇, 黎明, 方陆明, 李建章, 韩士杰, 苏晓华, 尹光彩, JIANGXi_dian, 杨娅, 阎秀峰, 朱波, 周宇飞, 宋永明, 何茜, 崔同林, 周国逸, 杨慧敏, 周国逸, 柯水发, 赖志华, 徐新文, 王新杰, HEXiu_bin, 刘锐, 徐扬, 鹿振友, 王春林, 王清文, 唐小明, 虞木奎, 沈熙环, 孙向阳, 玲, 喻理飞, 张冰玉, 宗文君, 程云清, 李吉跃, 李晓兰, 陈实, 孙阁, 齐涛, 张志毅, 王伟宏, , 郭蓓, 国庆, 李丙文, 宋爱琴, 陈峻崎, 3, 茹广欣, 温亚利, 李俊清, 周晓梅, 陈培金, 王建林, 刘志明, 周玉平, 王晓静, 长山, 王旭, 姚永刚, 张可栋, 蒋德明, 唐旭利, 陈放, 王春林, 关少华, 宋湛谦, 赵双荣, 杨伟伟, 闫俊华, 郑凌峰. 油松SSR-PCR引物筛选及反应体系的建立[J]. 北京林业大学学报, 2007, 29(2): 13-17.
WANG Lan-zhen, WANG Hang-jun, GAO Jin_hui, SONG Yan, YAN Jun-hua, TANG Jinnian, SONG Zi-juan, XU Xianying, JI Jin-jun, LIU Yo, FANG Lu-ming, LI Shu-jun, ZHENG Ling_feng, WANG Dong_mei, ZHU Lin-hong, YU Li-fei, ZHOU Guo-yi, YUAN Hai-jian, LIU Li-mei, ZHAO Liang, ZHANG Shi-ying, CHEN Pei-jin, SUN Ge, JIN Hongxi, LIU Zhi-ming, TANG Xu-li, ZHANG Dun ming, WANG Duo_dong, SONG Zhan-qian, WANG Chun-lin, . Selection of primers and establishment of SSRPCR reaction system on Pinus tabulaeformis Carr.[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2007, 29(2): 13-17.
Citation: WANG Lan-zhen, WANG Hang-jun, GAO Jin_hui, SONG Yan, YAN Jun-hua, TANG Jinnian, SONG Zi-juan, XU Xianying, JI Jin-jun, LIU Yo, FANG Lu-ming, LI Shu-jun, ZHENG Ling_feng, WANG Dong_mei, ZHU Lin-hong, YU Li-fei, ZHOU Guo-yi, YUAN Hai-jian, LIU Li-mei, ZHAO Liang, ZHANG Shi-ying, CHEN Pei-jin, SUN Ge, JIN Hongxi, LIU Zhi-ming, TANG Xu-li, ZHANG Dun ming, WANG Duo_dong, SONG Zhan-qian, WANG Chun-lin, . Selection of primers and establishment of SSRPCR reaction system on Pinus tabulaeformis Carr.[J]. Journal of Beijing Forestry University, 2007, 29(2): 13-17.
  • 摘要: 油松是我国特有的重要乡土针叶树种,开发合适的油松PCR-SSR引物并建立优化的反应体系,是开展油松天然群体和种子园人工群体遗传研究的基础.该研究以油松总DNA为材料,分析了Taq聚合酶、样本浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度以及引物浓度对PCRSSR扩增结果的影响,筛选出扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物12对,建立了稳定的、可重复的油松PCR-SSR最佳反应体系及PCR扩增参数.研究结果表明:在15 μL SSR-PCR反应体系中,样本最适宜浓度为30 ng,Mg2+的最适浓度为0.25 mmol/L,dNTP最适浓度为0.2 mmol/L,单引物的最适浓度均为250 nmol/L;Taq聚合酶在15 μL反应体系中宜加入0.375 U.统计利用所选12对引物,对辽宁兴城油松种子园内49个建园无性系进行了SSR-PCR反应,通过6%的变性聚丙稀酰胺凝胶电泳检测,每对引物扩增产物在100~250 bp之间的等位谱带数最大为10,最小为5,不同无性系间DNA谱带多态性丰富.油松SSR-PCR引物筛选及反应体系的建立,为今后利用SSR标记技术开展油松种子园的父本分析及选择性受精研究提供了一个标准化程序和强有力的工具.

     

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